目的:觀察仙芝樓靈芝孢子油軟膠囊對小鼠免疫力的影響。
1 材料和方法
1.1.1樣品
仙芝樓靈芝孢子油軟膠囊由福建仙芝樓生物科技有限公司提供,為瓶裝膠囊,內(nèi)容物為褐色粉末。置于密閉、陰涼干燥處保存,供試驗(yàn)用。臨用時(shí)用色拉油配制到所需濃度。
1.1.2主要試劑:DNFB、SRBC、豚鼠血清、印度墨汁
1.2試驗(yàn)動(dòng)物
18~22g健康雌性昆明種小鼠120只,由中國藥科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證號:蘇動(dòng)質(zhì)字第98004號。隨機(jī)分為3個(gè)試驗(yàn)組,分別進(jìn)行炭粒廓清試驗(yàn)、DTH試驗(yàn)和血清溶血素測定試驗(yàn)。
1.3劑量
每個(gè)試驗(yàn)組分別分為40mg/kg(低劑量組)、400mg/kg(中劑量組)、1200 mg/kg(高劑量組)和空白對照組。經(jīng)口每日一次給于小鼠相應(yīng)劑量的受試物,空白組給于等劑量的色拉油。連續(xù)給藥30 d后測量各項(xiàng)增強(qiáng)免疫力功能指標(biāo)。
1.4主要儀器:TIO00型電子動(dòng)物稱、722型分光光度計(jì)、打孔器
1.5試驗(yàn)方法
1.5.1 小鼠炭粒廓清試驗(yàn):各劑量組連續(xù)灌胃30d,每鼠尾靜脈注入4倍稀釋的印度墨汁(0.1ml/10g.bw),注入2min及10min分別從眼內(nèi)眥靜脈叢取血20ul,并將其加到2m10.1%Na2C03溶液中,用722型分光光度計(jì)在600nm波長處測定光密度值。
1.5.2 DNFB誘導(dǎo)小鼠DTH試驗(yàn)(耳腫脹法):
各劑量組連續(xù)灌胃30d。每鼠用剪刀將腹部毛剪去,范圍約3cmX3cm,用1%DNFB溶液50ul均勻涂抹致敏。5日后用1%DNFB溶液lO u l均勻涂抹于小鼠右耳進(jìn)行攻擊,同時(shí)用不含DNFB的溶液10ul均勻涂抹于小鼠左耳作對照。攻擊后24h頸椎脫臼處死小鼠,剪下左右耳殼,用打孔器取下直徑8mm耳片,稱重。左右耳片總量之差為腫脹度。同時(shí)取下小鼠脾臟、胸腺并稱重,計(jì)算臟器系數(shù)。
1.5.3血清溶血素測定試驗(yàn):
各劑量組連續(xù)灌胃30d。制備2 的綿羊紅細(xì)胞(SRBC)懸液,每只鼠腹腔注射0.2ml進(jìn)行免疫,4d后摘除眼球取血于離心管中,放置lh,200r/min離心10min,分離并收集血清。血清200倍稀釋后,按檢驗(yàn)方法測定樣品管及SRBC半數(shù)溶血時(shí)的光密度值。溶血素的量以半數(shù)溶血值(HCSO)表示。
2 結(jié)果
2.1仙芝樓靈芝孢子油軟膠囊對小鼠炭粒廓清作用的影響
2.2仙芝樓靈芝孢子油軟膠囊對DNFB誘導(dǎo)小鼠DTH的影響的結(jié)果,高劑量組小鼠胸腺/體重比值與對照組比較。
2.3仙芝樓靈芝孢子油軟膠囊對小鼠血清溶血素形成的影響 對照組相比較差異性顯著(P<0.05)。
從目前公開發(fā)表的研究報(bào)告中可以看出靈芝多糖的免疫調(diào)節(jié)作用主要集中在以下幾個(gè)方面:促進(jìn)單核/巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬功能、促進(jìn)細(xì)胞免疫功能、調(diào)節(jié)體液免疫功能、抗過敏、抗輻射和抗免疫抑制等。仙芝樓靈芝孢子油軟膠囊富含靈芝孢子經(jīng)物理破壁,超臨界C0萃取所得到的多糖和多肽,前期實(shí)驗(yàn)表明其在抗腫瘤,改善心腦血管疾病方面都要一定效果,本試驗(yàn)擬考察靈芝孢子油軟膠囊對免疫系統(tǒng)的影響。
(本文節(jié)選自《靈芝孢子油軟膠囊增強(qiáng)免疫力的研究》)