金天格膠囊對成骨細胞作用的臨床研究

    骨質疏松癥是一種以骨強度受損為特征的骨骼疾病。其病因很多，最終結果為成骨過程低于破骨過程，骨量和骨質量下降。成骨細胞是骨質生發、形成的物質基礎，只有其不斷的分裂增殖才可以產生豐富的膠原基質，通過礦化作用形成更多骨質。金天格膠囊的主要成份為人工虎骨粉。本研究觀察金天格膠囊對成骨細胞的影響，探討其對成骨細胞作用的機理。 

    主要研究方向：骨質疏松的診斷與治療，的MEM 培養液重懸細胞，接種于75cm~75cm培養瓶，于37℃，25％CO 條件下培養，次日換液棄去懸浮細胞，每隔兩日換液1次；消化后的骨碎片可貼于25cm~25cm培養瓶壁(25—40個碎骨粒／瓶)，加入含15％ PBS的MEM 培養液，37~C，25％CO 條件下培養，l周后換液，以后隔兩日換液1次，即得到酶消化法及骨片貼附法所獲得的人成骨樣細胞(HOB)。 

    應用金天格膠囊(金花企業股份有限公司高新制藥廠生產)lg，加入含l5％PBS的MEM培養液(pH值為7．3．7．4，過濾除菌)lOml中，用0．451~m濾器除菌，配成濃度為0．1g／ml的溶液。依上法可配制成濃度為5p~g／ml、10l~g／ml、20~g／ml的金天格膠囊藥液。 

    將處于生長旺盛的人成骨樣細胞(HOB)，接種于25cm~25cm培養瓶(第2代)，用無酚紅MEM 培養液(含15％PBS、VitC50~g／ml、青霉素50U／ml、慶大霉素50~g／m1)培養，取細胞
懸液加到24孔板上，每孔lml。放人37~C培養箱中培養。待細胞貼壁后，第2天加入配好的金天格膠囊藥液。 

    統計方法：定量指標用均數±標準差表示。采用x 檢驗或t檢驗，P<0．05為有統計學意義。 

    金天格膠囊藥液可以明顯刺激成骨細胞的增殖，與不用藥組對比有顯著差異，并隨藥物濃度的增加，成骨細胞數明顯增多(P<0．05)；反映成骨細胞活性的AKP、BGP隨藥物濃度的增加也相應升高，與不用藥組對比有顯著差異(P<0．05)；反映破骨細胞活性的PYD則隨藥物濃度的增加而相應下降，與不用藥組對比有顯著差異(P<0．05 o 

    成骨細胞是參與骨代謝的重要細胞，它與破骨細胞共同維持著骨代謝重建的平衡。骨質疏松發生的機理是骨形成落后于骨溶解，在骨的重建過程中無法完全修復破壞的骨質，使其骨量不斷減少、骨質量下降。因此，治療骨質疏松的關鍵是促進成骨細胞的成骨過程，緩解破骨細胞的破骨過程。本研究成功培養出HOB。堿性磷酸酶染色陽性細胞計數可直接代表該細胞群的數量與純度。 

    本研究聯合檢測金天格膠囊藥液干預試驗后的AKP、BGP、PYD的含量并進行細胞計數，結果表明加藥后細胞數隨藥物濃度增加而增加，AKP、BGP水平也相應提高，Ⅲ組的AKP、BGP水平較I組和II組增加明顯，與不用藥組對比存在統計學差異(P<0．05)，說明金天格膠囊有直接刺激成骨細胞增殖及加強其活性的作用，并且提高金天格膠囊的濃度(用量)有利于藥效的發揮。再者，標本檢測中發現的PYD，可能是成骨細胞傳代過程中部分細胞破壞，釋放某種物質降解膠原產生的，本研究顯示加大金天格膠囊藥液的濃度可使培養液中PYD的濃度下降(P<0．05)，這說明金天格膠囊也有抑制破骨的作用。 

    (本文節選自《金天格膠囊對成骨細胞作用的研究》)

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