臨床研究驅蟲斑鳩菊針劑治療白癜風的作用機制(一)

      人類白癜風是一種頑固性皮膚病，病因尚不清楚，發病機制至少涉及4種學說，即自身免疫、神經體液因素、自身細胞毒和接觸外源性物質等。近年來普遍認為自身免疫學說是白癜風的主要發生機制。驅蟲斑鳩菊(Vw)注射液自新疆特有菊科植物驅蟲斑鳩菊的種子中提取，主要成分黃酮含量為3g／L。多年臨床應用顯示，該藥對白癜風具有明顯的治療效果。考慮到該藥治療白癜風可能與機體免疫系統有關，我們著重研究了該藥對正常小鼠免疫系統、酪氨酸酶的合成及其mRNA表達的影響，以探討其作用機制，為在臨床上廣泛應用提供實驗依據。

 

1 材料和方法

1.1 材料

BALB／c小鼠，雌性，6-8周齡，購于中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所。VW 生藥0．25 g／mL，由新疆自治區人民醫院臨床藥學研究所提供。[³H]—TdR為中國原子能研究院產品。酪氨酸酶(6850 U／mg)為瑞典BIOCHEMIKA公司產品。TRIzol試劑盒為美國Gibco BRL公司產品。AccessRT—PCR試劑盒為美國Promega公司產品。熒光抗體為FITC一抗小鼠CD19，為BD公司產品。其余試劑均為進口或國產分析純。E960酶聯免疫測定儀為德國生產；PCR 擴增儀為Perkin-Elmer GeneAmp PCR Sys—tem 2400型；FACS Calibur流式細胞儀為BD公司產品。

 

1.2 實驗分組與給藥

按VW 劑量的不同，將BALB／c小鼠隨機分成4組，每日給藥量為：低劑量(vw-L)組87.5 mg／kg(為臨床用量的5倍)、中劑量(vw-M)組175 mg／kg(為臨床用量的10倍)、高劑量(vw-H)組350 mg／kg(為臨床用量的20倍)。用藥均在臨用前用生理鹽水配制；正常對照組注射等劑量生理鹽水，每組10只，每天給藥1次，腹腔注射，每次0.5 mL，共10次。

 

2 結果

2.1 VW對小鼠脾細胞增殖的影響

小鼠給藥10 d后，無菌取脾臟并測定T、B細胞的活性。與對照組相比，VW-L、VW-M、VW-H 3個劑量組均可明顯抑制小鼠脾臟T、B細胞的增殖(P<0 01，圖1略)，而且具有一定的量效關系。

 

2.2 VW 對SRBC致敏小鼠抗體生成細胞的影響

SRBC致敏小鼠抗體生成反應結果表明，VW—L、VW—M、vW—H 3個劑量組的D5 值分別是0．59±0．01、0．53+0．01、0．54+0．02，均明顯低于空白對照組的0．67+0．02(P<0．01)，而且具有一定的量效關系，說明該藥可抑制小鼠血清抗體的產生。

 

2-3 VW 對B細胞標志物CD19表達的影響

    小鼠給藥10 d后取脾淋巴細胞，采用流式細胞儀測定B細胞上表面標志物CD19的表達。結果表明，與對照組相比，VW-L、VW-M、VW-H組對B細胞表面標志物CD19的表達均有明顯的抑制作用(P<0.01)，而且具有一定的量效關系，表明VW 對體液免疫功能具有抑制作用。

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