腹腔沖洗液中FGF2表達(dá)改變與子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系

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周倩珺，葉艷娜，李嬋，黎普茜，李栩萍，蔣敏橋

(廣東省東莞市人民醫(yī)院，廣東東莞523018)

(安徽醫(yī)藥2012年9月：1308-1309)

【摘要】目的 檢測FGF2蛋白在子宮內(nèi)膜異位癥(EMs)患者及非內(nèi)異癥患者腹腔沖洗液中的表達(dá)，探討其在EMs發(fā)生、發(fā)展中的作用。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測45例子宮內(nèi)異癥患者(EMs組)及4o例非內(nèi)異癥患者(對照組)腹腔沖洗液中FGF2水平。結(jié)果 (1)在EMs組中，FGF2水平分別為(126.67±39.26)ng·L^-1，均高于對照組的(50.31±27.33)ng·L^-1，差異具有顯著性(P＜0.01)；(2)在EMs組中，III~IV期患者的FGF2水平為(118.75±45.81)ng·L^-1，高于I~II期患者的(90.43±22.05)ng·L^-1(P＜0.05)。結(jié)論 腹腔沖洗液中FGF2增加可能與EMs發(fā)病及發(fā)展有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】FGF2；子宮內(nèi)膜異位癥；腹腔沖洗液；酶聯(lián)免疫吸附試驗

越來越多的證據(jù)表明，子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis，EMs)患者與正常人子宮內(nèi)膜存在許多不同之處，表現(xiàn)為內(nèi)異癥患者的子宮內(nèi)膜細(xì)胞黏附、侵襲和血管形成能力明顯增強(qiáng)，使之具有異位種植和生長的能力。成纖維細(xì)胞生長因子2(Fibroblast Growth Factor 2，FGF2)是人成纖維細(xì)胞生長因子(FGFs)家族中的一員，FGF2在細(xì)胞的增殖、黏附、血管生成等過程中起著十分重要的作用。本研究擬通過檢測EMS患者及正常人腹腔沖洗液中FGF2的表達(dá)，探討FGF2在EMS發(fā)生及發(fā)展中的作用。

1 材料與方法

1.1 研究對象 EMs組：選取2011年4月~2012年2月期間在本院經(jīng)婦科手術(shù)并經(jīng)病理證實的子宮內(nèi)膜異位癥患者45例。年齡30~45歲，平均年齡42.5歲。運(yùn)用美國生殖學(xué)會子宮內(nèi)膜異位癥分期方法(r-AFS)分期，其中I~II期21例，III ~IV期為24例。對照組：收集同期因卵巢單純性囊腫(18例)、子宮肌瘤(10例)及不孕癥(12例)行腹腔鏡手術(shù)治療的非EMs患者共40例為對照組，患者年齡28~41歲，平均年齡38歲。所有婦女月經(jīng)周期規(guī)則，術(shù)前6個月無甾體類激素治療史，并排除了內(nèi)分泌、腫瘤、急性感染等急慢性疾病。

1.2 試劑 人FGF2定量ELISA試劑盒購自北京晶美生物工程有限公司。

1.3 標(biāo)本處理 進(jìn)腹后用無菌吸管吸取生理鹽水20 ml注入盆腔，無菌注射器于子宮直腸陷窩抽吸腹腔沖洗液約4~5ml。立即將腹腔沖洗液置于無菌EP管內(nèi)，低溫下3000 r·min 離心10 min，再收集上清液放人無菌EP管中，置于-70℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩?/span>

1.4 檢驗方法 酶聯(lián)免疫吸附試驗法(ELISA)檢測人腹腔沖洗液中FGF2蛋白水平，具體操作方法嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 觀測數(shù)據(jù)為計量數(shù)據(jù)，用x(-)±s表示，各組間比較采用t檢驗，使用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者腹腔沖洗液中FGF2濃度 EMs組腹腔沖洗液中FGF2水平達(dá)(126.67±39.26) ng·L^-1，顯著高于對照組的(50.31-4-27.33)ng·L^-1(t=8.21，P＜0.01)，見表1。

2.2  FGF2與期別及r-AFS評分的關(guān)系EMs組中，III~IV期FGF2水平為(118.75±45.81)ng·L^-1，明顯高于I~II期的(90.43±22.05)ng·L^-1(t=4.08，P＜0.01)，見表2。

3 討論

3.1 FGF2的結(jié)構(gòu)及功能 人源性FGF2基因定位于4q26~27，全長71.53 Kb，有3個外顯子和2個內(nèi)含子，mRNA全長67.74 Kb，FGF2是參與血管化調(diào)控的主要生長因子，可維持血管內(nèi)皮細(xì)胞的存活和增殖，其在細(xì)胞的增殖、分化、黏附、血管生成等中起著十分重要的作用。FGF2基因敲除的小鼠表現(xiàn)出血管緊張度缺陷、創(chuàng)傷愈合過程中內(nèi)皮細(xì)胞的遷移受到抑制、創(chuàng)傷愈合延遲等現(xiàn)象，表明FGF2通過控制內(nèi)皮細(xì)胞的增生和遷移來調(diào)節(jié)血管形成。

3.2 FGF2與EMS的關(guān)系 子宮內(nèi)膜異位癥意指當(dāng)具有生長功能的子宮內(nèi)膜組織(腺體和間質(zhì))出現(xiàn)在子宮體以外的身體其他部位時稱子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis，EMs)。本病具有種植生長、侵襲、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和易復(fù)發(fā)等類似惡性腫瘤的特點(diǎn)。EMs的病因復(fù)雜，發(fā)病機(jī)理仍不十分清楚。最近的研究表明，EMs的存在與病灶內(nèi)的血管形成與生長緊密相關(guān)。

Zhao等研究發(fā)現(xiàn)FGF2相關(guān)結(jié)合受體與子宮內(nèi)膜異位癥無明顯相關(guān)性。而本實驗ELISA實驗結(jié)果則提示EMs組腹腔沖洗液中FGF2水平較對照組顯著為高，與Bourlev等研究結(jié)果類似，且隨著疾病嚴(yán)重程度增加FGF2水平的升高更為顯著。據(jù)此認(rèn)為FGF2與EMs的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。推測其可能機(jī)制為：返流入盆腔的異位內(nèi)膜細(xì)胞及腹膜間皮細(xì)胞分泌FGF2聚集在腹腔內(nèi)，FGF2作為一種血管化調(diào)控的主要生長因子，可促使盆腔異位內(nèi)膜基底部毛細(xì)血管的數(shù)量和面積明顯增加，使異位子宮內(nèi)膜得以生長、增生和分化；同時，腹腔內(nèi)FGF2的過表達(dá)還可募集中性粒細(xì)胞匯聚于異位灶，這些炎性細(xì)胞分泌的多種炎癥因子及生長因子，反過來刺激腹膜間皮細(xì)胞及異位內(nèi)膜細(xì)胞再分泌FGF2，加劇了異位癥的增殖和炎癥反應(yīng)，從而導(dǎo)致了疾病晚期盆腔的廣泛黏連。

總之，本試驗推測FGF2參與了EMs的發(fā)生、發(fā)展過程，對闡明子宮內(nèi)膜異位癥的血管發(fā)生機(jī)制有重要意義，有望為EMs的診斷、治療及其預(yù)后提供一種新方法。

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