男性不育癥的檢測及意義

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【關鍵詞】不育；實驗檢測；男性

男性不育癥是人類生殖研究中心的重要課題，據WHO資料顯示，不育癥占育齡夫婦的15%，為探討其病因，本文就近年來在臨檢、生化、微生物、免疫學、內分泌學、細胞遺傳學和分子生物學檢驗方面對男性不育癥的研究結果以予介紹。

1 臨床檢測

1.1 選擇精液涂片 Serebrovska等選擇精液涂片對生育組37例與不育組67例進行精子形態及生精細胞分析，結果形態，小頭及錐形頭子的百分率兩組問差異均有統計學意義(P＜0.01)，不育組生精細胞與精子比例，精原細胞百分率及次級精母細胞百分率明顯高于生育組，證實可作為男性不育癥療效觀察和判斷預后的指標之一。

1.2 Sakamoto等用精子尾部卷曲試驗與低滲腫脹試驗評估精子的活動功能，結果生育組和不育組對照差異有統計學意義(P＜0.01)，精子卷尾率與精子尾總腫脹率高度正相關(r=0.912)，精液中白細胞數大于1.0×10⁶個/mL可能引起不育，不育組的白細胞精子癥的精子總數、直線前向運動精子的百分率及總數、精子一宮頸黏液的體外穿透試驗優良率、精子頂體酶活性均明顯低于正常組，精子畸形率高于正常組，而精液量、精子密度、精子活率兩組差異無統計學意義。

2 生化檢測

某學者檢測不育患者磷酯酶A2(PIA2)，正常精漿0~2.9 U/L，不育組(51例)49%精漿PLA2高于2.9 U/L。Agarwal等因精索靜脈曲張(VC)所致不育癥患者測氧自由基，結果精索靜脈血漿丙二醛(MDA)和紅細胞MDA的含量明顯高于對照組(P＜0.01)，VC靜脈血谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)和紅細胞超氧化物歧化酶(SDD)活力低于對照組(P＜0.01)。

某研究對365例不育者精子頂體酶活性測定顯示，頂體酶與鏡下精液白細胞數，精子畸形率顯著負相關，而與精子活率、活力明顯呈正相關。由精子精氨酸羧酶活性反映頂體酶的總活性顯示：頂體酶活性呈正偏態分布。實驗組與對照組差異有統計學意義，表明影響不育的指標均與頂體酶活性相關。有文獻報道精子膜脂類過氧化反應與精子存活率有關，在健康者和不育者差異有統計學意義(P＜0.01)。測精漿蛋白水解酶活力：生育組1420~2870 U/L，不育組1326~3628 U/L，液化異常或黏稠度增高的不育組540~852 U/L。用Singer法測精子透明質酸酶(HYO)是判斷精子生育力的重要指標。用動力學酶法測精漿酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(ALP)，男子生育力指數大于1的精液，其ACP、ALP活性明顯高于生育力指數小于1者，提示在男性不育者作精液常規時，應加測ACP和ALP。用毛細管電泳儀可分離人精漿蛋白組份20余種，對無精子精液精漿蛋白分析提供了新的診斷技術。

3 微生物檢測

男性不育與生殖道解脲支原體(Uu)、沙眼衣原體(CT)和陰道滴蟲感染有關，而與需氧菌(葡萄球菌、大腸埃希菌)無關。某研究用免疫熒光法和分離培養對不育組768例和對照組266例檢測Uu和CT，不育組和對照組Uu陽性率分別為36.5%和14.28%，CT 陽性率分別為28.64%和5.2% (P＜0.01)。用電鏡觀察Uu感染的不育患者精子，可見部分精子的頭、尾部有明顯顆粒狀物質吸附，將抗Uu血清做免疫酶(PAP)染色，81.81%精子上有PAP陽性的棕黃色Uu顆粒狀吸附，說明Uu可吸附于精子表面，使精子鉤運動負荷增加，導致部分男性不育。用PCR法測精液中巨細胞病毒，不育組陽性率30%。

4 免疫學檢測

有文獻報道用ELISA法檢測不育組72例和對照組20例的精漿白介素8(IL-8)，結果18例不育組中白細胞精子癥組明顯高于對照組(P＜0.01)，非白細胞精子組中自細胞數與精漿IL-8呈正相關(r=0.883，P＜0.01)且治療前后精漿IL-8濃度有明顯差別，并與白細胞數同步下降。IL-8是反映生殖系統感染，診斷及療效判定的良好指標。用ELISA法對72例不育者精漿中尿激酶，精漿參數生育組30例，尿激酶值(4600±1900) U/mL，精液液化不良組20例，值(2720±1331) U/mL，精子活率低下組22例，值(2447±933) U/mL(P＜0.01)，精漿中尿激酶含量變化可影響精子的活力和精液的液化。ELIAS法測血清抗精子抗體(AsAb)陽性率12.90% (n=31)并與人類白細胞抗原(HLA)相關。精液中存在抗精子抗體影響精子活力與精子畸形率。AsAb陽性精漿C3d及C3d/C的結果均較生育組顯著增高，AsAb與精子膜固有成分結合能導致補體的活化，使C3裂解加速，進而導致精子結合功能受損。有文獻報道對576例不育者測精漿免疫抑制物質(SPLM)＜360 U/mL達40%，AsAb陽性率18%，SPIM與AsAb間無明顯關系，但SPLM活性降低和AsAb存在是免疫性不育的主要因素。ELISA法測抗心磷脂抗體(ACA)的lgG、IgM33例，不育組IgG-ACA和IgM-ACA顯著高于對照組，ACA與不育癥有關。

5 內分泌學檢測

劉睿智等測定不育男性血清與精漿5種生殖激素，結果顯示這5種激素在血清與精漿中含量變化不一致，精漿間質細胞(ICSH)，泌乳素分別與精子活力、密度呈正相關，血清ICSH、濾泡刺激素分別與精子活力、密度及血清睪酮負相關。采用比色法和原子吸收光譜法測定甲亢者精漿內中性α-葡萄糖苷酶值(18.88±17.31) U/mL，果糖(10.52±5.33) μmol/mL，鋅(155.80±88.71) μg/mL，均低于正常值，早亢會影響附睪、精囊腺及微量元素的代謝。

6 細胞遺傳學檢測

岳林采用酶細胞化學技術觀察精予尾部4種酶(SDH、LDH、ATP、ACP)活性，自發性精子活力低下者前3種酶活性下降且與生育組差異有統計學意義，ACP雖有下降但差異無統計學意義，此方法可作原因不明顯男性不育診斷的補充。有研究報道，制備外周血染色體標本，對1074例男性不育者G顯帶分析中期分裂相25個，嵌合型加倍分析，染色體異常者113例(10.52%)，其中性染色體異常98例(9.12%)，以克氏征(Klinefelter’s綜合征)最多(82例)，常染色體異常16例(1.49%)，單純47，×Y74例，嵌合型46，XY/47，XY5例，47，XY/48，XY1例，47，XY/46，XY15P 2例，46，X男性綜合征4例。在536例原發不育男性中查出染色體異常102例(19.03%)，其中47××Y有92例，46，××男性5例，無精癥染色體異常率為18.68%。在73例中發現23例染色體核型異常(31.50%)，其中性染色體異常19例(82.66%)，無精子、少精子者染色體異常20例(87%)。男性不育染色體異常，涉及性染色體和常染色體，在無(少)精子者中應進行染色體檢查。YRRM基因的表達在男性不育者精子生成中起重要作用。

7 分子生物學檢測

細胞內DNA結構和功能的改變如雄性激素受體基因、CyellinA基因的變化等都會對配子的形成、精子的活力產生影響。夏薇等用PCR法對340例男性不育者進行YRRM缺損情況篩查，有7例該基因缺損(2%)，均表現出無精或少精。孫圓景等對30例少精不育者精液的雄性激素受體(AR)基因8個外顯子(A、B、C、D、E、F、G、H)分別進行擴增分析，外顯子A 即基因轉錄激活區發生點突變3例，插入突變4例，突變率為23.3%，外顯子H發生缺失突變1例(3.3%)。外顯子G發生點突變l例(3.3%)，總突變率為30.3%，說明雄性激素受體基因外顯子A即基因轉錄激活區的突變是造成少精不育的重要原因。對45例少精不育癥用印跡分析(RFIP)篩選與少精不育相關的新分子標記，用PAPD(DNA)技術收集其DNA指紋片段，發現其含“AAT”和“GCG”密碼子重復的中度重復順序，說明具有RFLP現象的中度重復順序是與精子發生相關的某一基因的表達調控部分，因其易在基因組中發生變異從而影響到精子的發生。

綜上所述，精液檢驗項目是檢查男性不育癥原因及療效觀察的主要手段，也用于輔助診斷男性一些生殖系統疾病。

(彭蘭，萬芳，男性不育癥的檢測及意義[J]檢驗醫學與臨床2012年2月第9卷第4期：453-454)

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