男性不育精液支原體檢測藥敏分析

　　支原體是一種介于細菌與病毒之間，能在人工培養上生長繁殖的最小原核微生物，與男性泌尿生殖系統的多種疾病有關，為了探討男性不育的病因及治療方案，檢測了120名不育者精液中的解脲支原體(UU)和人型支原體(Mycoplasma hominis,MH)，并對UU和MH進行藥敏試驗分析。報告如下。

　　1 資料與方法

　　1.1 一般資料

　　對照組：生育男性30例，年齡25～38歲。試驗組：不育男性120例,已婚同居2年以上,未避孕,年齡23～40歲。

　　1.2 樣本采集

　　手淫法將精液射入無菌干燥廣口瓶內,充分液化后，取精漿備用。

　　1.3 檢測方法

　　支原體培養和藥敏試驗采用廣東珠海益明生物工程制品廠生產的支原體培養。鑒定,藥敏一體化試劑盒操作說明進行。將送檢精液200 μl加入精體培養基中。充分振搖后,將混有精液的培養基分別加入培養孔和藥敏孔中各100 μl,然后每孔加2滴無茵礦物油,以防水分蒸發,放入35～37℃恒溫箱24～46 h。觀察微孔中培養基顏色變化,分別記錄支原體及10種藥敏結果，判斷敏感度。各孔培養基清亮,顏色由黃變紅。表明有支原體生長記為陽性,不變色表明無支原體生長記為陰性。

　　1.4 統計學分析

　　計數資料比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

　　2 結果

　　30例生育組精液中檢出UU 2例,陽性率為6.2%;120例不育組精液中檢出UU 31例、MR 6例、UU+MH 10例，陽性率為39.17%。2組結果經統計學處理，陽性率差異有統計學意義(P＜0.01)。藥敏試驗結果。見表1。表1 47例UU、MH藥敏結果比較（略）

　　3 討論

　　不育癥的原因約35%～45%與男方有關［1］，其中相當一部分患者是由于生殖系統的感染。隨著男性學研究的不斷開拓，評價男性生育能力的檢測手段日益更新。檢測精液中的UU和MH不失為有意義的檢測手段之一。本文研究結果表明：支原體感染是不育癥中不可忽視的重要因素。

　　支原體生殖道感染導致男性不育有以下幾方面的機制：(1)支原體促進睪丸炎癥細胞的侵潤，損害精子生成且支原體可穿入生精細胞中，造成其結構破壞并從曲精小管中脫落，生精細胞結構破壞，從而使精子的數量減少；(2)支原體吸附于精子表面，攝取精子內的營養物質，利用膜內膽固醇，耗竭精子的主要成分，使其質量功能受損，精子死亡率增高。(3)支原體常吸附于精卵識別與融合區，造成精子運動阻力增大，運動能力減弱，并妨礙卵子對精子的識別、融合等受精過程［2］。(4)支原體感染后刺激了睪丸生精細胞，巨噬細胞產生白介素6(IL��6)和腫瘤壞子因子(TNF��α)［3］，以及支原體可導致白細胞精子癥，活化的白細胞分泌可溶性產物TNF��α等［4］而TNF��α、IL��6均可誘導精子凋亡的增加［5］。同時TNF��α升高后使活性氧(ROS)增高。一方面ROS增高誘發DNA損傷會加速生殖細胞凋亡過程［6］。另一方面ROS可引發精子膜上的多聚不飽和脂肪酸發生脂類過氧化反應，生成的H2O2具有很強的細胞毒性使精子活率降低。

　　由于支原體缺乏細胞壁，所以對影響細胞壁合成的抗生素不敏感，對抑制或影響蛋白質合成的抗生素敏感。本組47株支原體對10種抗生素檢測的敏感率顯示：交沙霉素(95.74%)，強力霉素(91.49%)，阿齊霉素(93.61%)，美滿霉素(89.36%)對支原體有較高的敏感性，并且在治療中不易產生耐藥性，可作為治療男性不育者感染支原體后的首選藥物。紅霉素，羅紅霉素對支原體感染的敏感性次之，其抗菌機制主要是拮抗尿原體DNA旋轉酶A和B亞單位，從而阻斷支原體DNA復制達到殺滅支原體的目的，可作為次選藥物。氧氟沙星中介度為最高，可能是由于這種抗生素在酸性條件下活性會下降，但其具有細胞內濃度分布高的特點。傳統使用四環素治療支原體感染的敏感率在逐年降低，其原因可能是支原體基因組中帶有鏈球菌耐四環素基因，產生耐藥性所致［7，8］。另外，位于支原體染色體上旋轉酶基因發生突變，使DNA旋轉酶靶位改變，從而降低藥物積累產生耐藥性。綜上所述，本研究認為：采用支原體培養，鑒定，藥敏一體化的試劑盒檢測不育者精液中的支原體不僅可區別于遺傳，免疫，生化等原因導致的不育，還可使部分原因不明的患者找到病因并得到及時有效的治療。

　　參考來源：《河北醫藥》2008年7月30卷7期；《男性不育 精液 支原體檢測 藥敏分析》；劉艷波 左一鵬

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