精索靜脈曲張不育患者免疫學和性激素的研究

　　精索靜脈曲張(VC)是導致男性不育癥的主要原因，但該病引起不育的機制至今尚未完全闡明。為了從免疫學角度進一步了解其與該病的關(guān)系，采用流式細胞計數(shù)儀從2002年12月－2004年12月觀察了20 例VC不育癥患者精索靜脈血和外周血中免疫細胞的改變，隨機選擇18 例年齡相同的腹股溝斜疝患者為對照組，同法檢測。同時兩組患者精索靜脈血與外周血中性激素水平采用化學發(fā)光法測定和精液分析。報告如下：

　　目的：了解精索靜脈曲張(VC)患者的免疫功能和性激素狀態(tài)，為所致不育提供參考資料。

　　方法：選擇20 例24～35 歲VC患者精索靜脈血和外周靜脈血進行免疫細胞、性激素和精液檢測。隨機選擇18 例年齡相同、已生育的腹股溝斜疝患者為對照組，同法檢測。

　　結(jié)果：VC患者多項免疫指標值低于對照組，精索靜脈血性激素與對照組差異有顯著性。

　　結(jié)論：VC患者機體免疫功能降低，可能是破壞血睪屏障、損害睪丸致睪酮降低的原因之一；精索靜脈血可反映VC患者血中性激素實際水平。

　　1 資料與方法

　　1.1 一般資料

　　臨床診斷VC的患者(曲張組)20 例，其中左側(cè)18 例，右側(cè)2 例，臨床分度均為Ⅲ度(采用Ⅲ度法)；年齡24～35 歲。病程2～5年。術(shù)前行彩色多普勒超聲和3次精液分析檢查，排除可能存在的睪丸和附屬性腺疾病及其他可能影響精液質(zhì)量的因素。精索靜脈低位結(jié)扎術(shù)中從已結(jié)扎的精索靜脈近睪丸側(cè)抽取精索靜脈血3 mL，同時抽取外周血3 mL，立即送檢，對照組選取18 例26～36 歲，已生育的腹股溝斜疝患者(斜疝組)，經(jīng)彩色多普勒超聲檢查，排除精索靜脈曲張。在行疝修補術(shù)時抽取精索靜脈血和外周血液標本。

　　1.2 檢測方法

　　免疫細胞測定取精索靜脈血及外周血各100 μL，分別加單抗20 μL［IMK�睱ymphocyte SimultestTM試劑盒(BD公司)］低速度混旋，置于室溫暗處孵育20 min；加入紅細胞裂解液，混勻，置室溫暗處5 min，直至溶液外觀呈現(xiàn)澄清透明狀，立即離心；傾去上清，低速混勻，加入5 mL PBS，離心，如此以PBS液洗2次。傾去上清后，每管加入固定液0.5 mL，置于4℃冰箱10 min，待流式細胞計數(shù)儀(FACSCalibur，BD)分析。流式細胞儀安裝軟件Cell Quest，每個試管獲取細胞數(shù)15 000個。

　　卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、睪酮(T)和泌乳素(PRL)測定采用化學發(fā)光法，試劑由美國拜耳公司提供，操作按藥盒說明書進行。測量儀器為美國拜耳公司的ACS：180 SE自動化學發(fā)光系列。

　　兩組精液分析，精液標本于禁欲1周后用手淫法取得，并立即于恒溫箱中保存，液化后進行檢測。儀器采用北京清華同方彩色精子電腦檢測系統(tǒng)(按照WTO標準)。

　　1.3 統(tǒng)計學處理

　　所有數(shù)據(jù)均用±s表示，組間比較采用t檢驗進行統(tǒng)計學處理，P＜0.05表示差異有顯著性。

　　2 結(jié) 果

　　2.1 兩組患者精索靜脈血免疫細胞檢測結(jié)果(見表1)表1 兩組精索靜脈血免疫細胞的測定結(jié)果

　　2.2 兩組外周血免疫細胞測定結(jié)果(見表2) 表2 兩組外周血免疫細胞測定結(jié)果

　　2.3 兩組患者精索靜脈血FSH、LH、T、PRL檢測結(jié)果(見表3)表3 兩組精索靜脈血FSH、LH、T、PRL測定結(jié)果

　　2.4 兩組外周血FSH、LH、T、PRL測定結(jié)果(見表4) 表4 兩組外周血FSH、LH、T、PRL測定結(jié)果

　　2.5 兩組患者精液分析檢測結(jié)果(見表5)表5 兩組精液分析結(jié)果

　　3 討 論

　　VC多見于青壯年，在男性人群中的發(fā)病率為10％～15％，而在男性不育中占21％～41％。其導致不育的原因被認為是由于曲張靜脈內(nèi)血液滯留，使睪丸局部溫度升高，影響睪丸血液循環(huán)，CO2蓄積和代謝產(chǎn)物抑制精子發(fā)育，引起精子過早脫落，使精子不能正常成熟。還有內(nèi)分泌功能障礙、代謝物質(zhì)反流等學說［1］。但造成不育的機制尚不清楚。

　　近年來隨著基礎(chǔ)醫(yī)學研究的進展，尤其是免疫學的飛速發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)免疫因素在VC不育中起著重要作用［2］。在正常情況下由于受到生殖系統(tǒng)血睪屏障的隔離作用、免疫抑制功能及機體主動免疫調(diào)節(jié)機制等因素制約，機體并不產(chǎn)生自身免疫反應(yīng)。當免疫功能低下時可影響機體防御屏障功能，使上述保護作用受損，致使精子抗原與機體自身的免疫發(fā)生接觸而產(chǎn)生抗精子抗體(AsAb)，進而干擾正常精子的形成及發(fā)育，引起無精或少精而導致不育［3］。本研究從確診的VC患者做精索靜脈低位結(jié)扎時采集近睪丸側(cè)的靜脈血，應(yīng)用流式細胞計數(shù)儀測定免疫細胞的變化，這部分血能反映睪丸的免疫和代謝情況。研究顯示VC患者精索靜脈血和外周靜脈血多項免疫指標值均低于對照組，其中CD4、CD4／CD8、B�瞔ell等指標下降最為顯著(P＜0.05)，提示VC可引起體液免疫和細胞免疫活動的變化，推測這種機體免疫功能降低因素有可能成為破壞血睪屏障的原因之一。進而能更好地解釋為何精索靜脈曲張多發(fā)生于一側(cè)，而卻造成雙側(cè)睪丸組織損害。

　　VC可引起睪丸間質(zhì)水腫、間質(zhì)血管病變及對側(cè)睪丸的病變等病理損害［4］。由于間質(zhì)細胞的損害會導致外周血中性激素水平的改變，從而反饋影響下丘腦垂體睪丸軸，使血液FSH、LH和PRL水平發(fā)生變化，但國內(nèi)外文獻對VC患者血清性激素水平的變化報道很不一致。王益鑫等［5］的研究認為VC患者血清FSH、LH、T均在正常值范圍。而另有報道VC患者血清FSH、PRI明顯高于正常人，T則與正常人無差異［6、7］。本研究采用精索靜脈血與外周血分別與對照組進行比較，結(jié)果顯示VC患者外周血FSH、LH值升高，T值與對照組差異無顯著性(P＞0.05)；而精索靜脈血FSH、LH值升高，T值則降低(P＜0.05)。可能與本組VC均為重度曲張病例、睪丸受損較重、間質(zhì)細胞T的分泌受到抑制，而致使精索靜脈血T濃度下降有關(guān)。由于VC所致睪丸的損害隨時間越長越嚴重，受損的曲細精管及間質(zhì)細胞越多，使FSH、LH升高，刺激間質(zhì)細胞維持T正常水平，但最終逐漸失代償，睪丸曲細精管和間質(zhì)細胞功能受損嚴重，至此FSH、LH已處于高值，而T始終處于低水平。外周血的性激素濃度可受多種因素影響，睪丸、附睪、腎上腺、前列腺組織中T含量明顯高于血中T濃度［8］。睪酮在某些靶器官的高濃度聚集可影響外周血T濃度，而外周血的稀釋作用也是不能忽略的一個重要因素。我們認為由于以上多種因素可影響外周血中性激素濃度，而精索靜脈血則較少受以上因素影響，能較為真實地反映VC患者血中性激素的水平。

　　精液分析是評價男性生育力的最基本方法，可對70％的男性不育原因做出明確診斷，其中精液量、精子密度、精子活力及精子活率等是提示睪丸生精功能的重要指標。本文分析結(jié)果表明，VC對睪丸功能的影響在精液中主要表現(xiàn)在精子數(shù)目減少、畸形精子異常增加、精子活動度降低。故此精子質(zhì)與量的改變可能是VC不育的主要原因。

　　參考來源：《臨床醫(yī)藥實踐》2006年11月15卷11期；《精索靜脈曲張不育患者免疫學和性激素的研究》；常江平

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