引起腹瀉的不凝集弧菌100例檢查及藥敏試驗(yàn)

　　弧菌在自然界中分布廣泛，由致病性弧菌引起的感染性腹瀉或食物中毒時(shí)有發(fā)生。為了解夏季多發(fā)性腹瀉病的致病性弧菌的分布和更好地配合臨床治療，從在我院腸道門診就診的腹瀉病人樣本中，篩出100例不為O1抗血清凝集的不凝集弧菌，進(jìn)行了系統(tǒng)的鑒定和藥物敏感試驗(yàn)，并在北京市西城區(qū)防疫站的幫助下進(jìn)行了非O1群霍亂弧菌的血清學(xué)分型。現(xiàn)將結(jié)果分析如下。

　　1 材料

　　1.1 標(biāo)本來(lái)源 從來(lái)本院腸道門診就診的部分病人糞便標(biāo)本中采集。

　　1.2 培養(yǎng)基及試驗(yàn) 9種微量生化管及GYZ-9V編碼冊(cè)由浙江省軍區(qū)后勤部衛(wèi)生防疫檢驗(yàn)所生產(chǎn);O1群及O139霍亂弧菌診斷血清，非O1群霍亂弧菌分型血清，藥敏紙片均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所;有效期內(nèi)使用;堿性蛋白胨水，慶大平板，M-H平板，普通瓊脂培養(yǎng)基及其它生化鑒定管生化試劑均由本院細(xì)菌室自制。

　　2 方法

　　2.1 篩選 將病人標(biāo)本接種于堿性蛋白胨水中37℃6～8h增菌后，轉(zhuǎn)種于慶大平板37℃16～18h培養(yǎng)后，挑取典型菌落且動(dòng)力（+）分別與O1、O139霍亂弧菌診斷血清進(jìn)行玻片凝集，不凝集弧菌接種普通瓊脂培養(yǎng)基備用。

　　2.2 生化及血清學(xué)鑒定 將收集的100株不凝集弧菌做一系列的生化試驗(yàn)，觀察生化學(xué)特性，凡符合非O1群霍亂弧菌生化特性的做血清凝集試驗(yàn)定出菌型，其它不凝集弧菌根據(jù)生化反應(yīng)的結(jié)果定種。

　　2.3 藥敏試驗(yàn) 將100株不凝集弧菌涂抹接種在M-H平板上，從我院臨床常用的抗生素中挑選10種藥敏紙片分別貼在平皿表面37℃過(guò)夜，按美國(guó)NCCLS97年K-B法紙片標(biāo)準(zhǔn)判定藥敏結(jié)果。

　　3 結(jié)果

　　3.1 生化特性 篩選出的100株不凝集弧菌在慶大培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，菌落扁平，光滑邊緣整齊，動(dòng)力、氧化酶、硝酸鹽還原試驗(yàn)陽(yáng)性，分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，大多數(shù)菌株甘露糖（+），能液化明膠，阿拉伯糖（-），H 2 S（-），部分菌株0.9%NaCl不生長(zhǎng)，根據(jù)9項(xiàng)微量生化試驗(yàn)結(jié)果結(jié)合上述其它生化試驗(yàn)按GYZ-9V編碼冊(cè)查出符合生化特征的細(xì)菌名稱，見(jiàn)表1。

　　表1 100株不凝集弧菌的細(xì)菌分布及其9項(xiàng)微量生化結(jié)果（略）

　　3.2 血清學(xué)結(jié)果 把符合非O1群霍亂弧菌生化特性的40株菌按VBO系統(tǒng)分型其中有27株可分型，可分型率67.5%，分屬七個(gè)血清型包括O2、O6、O7、O11、O27、O32、O51，其中O32居多，其次是O2、O6、O7、O27，見(jiàn)表2。

　　表2 40株非O1霍亂弧菌菌型分布（略）

　　3.3 藥敏結(jié)果 100株不凝集弧菌藥敏結(jié)果，見(jiàn)表3。40株非O1群霍亂弧菌藥敏結(jié)果，見(jiàn)表4。

　　表3 100株不凝集弧菌藥物敏感試驗(yàn)（略）

　　表4 40株非O1群霍亂弧菌藥敏結(jié)果 株數(shù)（略）

　　4 討論

　　近年來(lái)，臨床上常見(jiàn)急性腹瀉病人中有許多是感染了致病性弧菌而引起，國(guó)際上對(duì)弧菌科中能感染人類而引起胃腸炎或其它疾病的研究進(jìn)展迅速，僅弧菌屬中致病性弧菌就有十余種 ［1］ ，特別是1992～1993年在印度、孟加拉、泰國(guó)等地由非O1群霍亂弧菌O139引起的典型霍亂樣疾病的流行，改變了人們認(rèn)為只有O1群霍亂弧菌對(duì)人有強(qiáng)烈致病性并引起廣泛暴發(fā)流行的傳統(tǒng)觀察。現(xiàn)在我們從100株不凝集弧菌中分離出非O1群霍亂弧菌40株，致傷弧菌14例，副溶血性弧菌13例，霍利斯弧菌3株，河弧菌2株，檢出率72%;可分型非O1群霍亂弧菌27株，分布在M1、M2、M6、M7、M10五個(gè)多價(jià)中，與西城防疫站歷年檢出情況相符，另外我們也檢出了新被確認(rèn)是病原菌的氣單胞和鄰單胞菌屬中 ［2］ 的溫和氣單胞15株，親水氣單胞3株，豚鼠氣單胞1株，類志賀鄰單胞4株，這都應(yīng)該引起我們足夠的重視。

　　從藥敏結(jié)果分析，100株不凝集弧菌對(duì)慶大霉素、氟哌酸、丁胺卡那、頭孢噻肟、頭孢三嗪最為敏感，敏感度>95%，應(yīng)作為臨床治療腹瀉的首選藥。對(duì)紅霉素、頭孢噻吩、痢特靈、復(fù)方新諾明有一些菌株產(chǎn)生耐藥，耐藥率>10%。從40株非O1群霍亂弧菌的藥敏結(jié)果上看，只有4株對(duì)痢特靈耐藥，對(duì)其它9種藥100%敏感，高敏率在95%以上，這次調(diào)查結(jié)果為臨床用藥提供了依據(jù)。

　　在臨床方面，100例患者中14歲以下兒童5例，15～16歲青少年2例，成人93例，發(fā)熱9例，嘔吐41例，腹痛85例，腹瀉平均5～6次/日，稀便90例，粘液便10例，便中有WBC39例，有RBC16例，臨床診斷痢疾2例，腸炎98例，提示臨床上大多數(shù)急性腸胃炎可能與致病性弧菌感染有關(guān)。

　　致病性弧菌在自然界廣泛存在，海灣、江河出口、內(nèi)陸湖河水、海產(chǎn)品、水產(chǎn)品、以致鮮豬肉中都檢出致病性弧菌的報(bào)道，人類與這樣的環(huán)境接觸就有可能被感染，尤其是夏季，細(xì)菌滋生迅速，多數(shù)急性腹瀉患者都是因?yàn)槭秤昧吮晃廴镜氖澄锒�引起腹瀉，應(yīng)注意飲食衛(wèi)生，避免生吃與交叉污染。 （參考來(lái)源：引起腹瀉的不凝集弧菌100例檢查及藥敏試驗(yàn)，李晉芳，中華醫(yī)學(xué)研究雜志2005年第5卷第8期）

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