復方塞隆膠囊對小鼠免疫亢進的抑制作用

    塞隆骨，是高原特有動物高原鼢鼠的全骨風干品。是我國建國以來第一個國家級一類動物藥材，其性微溫、味辛咸，人肝腎經，主要功能為驅風除濕、散寒、舒筋活絡、強筋健骨及增強機體抗力等。據報道，塞隆骨具有抗炎鎮痛作用并能1：1替代虎骨，塞隆風濕酒試驗和細胞染色體畸變試驗結果均呈陰性。塞隆骨的藥用價值已經受到了眾多醫藥工作者的關注，尤其是對于類風濕性關節炎的治療作用成為研究者關注的焦點。本實驗室一直在進行復方塞隆膠囊骨治療類風濕性關節的研究工作。前期的藥效學實驗已經充分證明復方塞隆膠囊骨對類風濕性關節炎有非常好的治療預防效果，且具有鎮痛，抗凝血等作用。為了進一步研究復方塞隆膠囊骨，為其深層次開發利用提供理論依據本實驗室對復方塞隆膠囊骨的做用機制進行了初步研究。 

    受試藥物：復方塞隆膠囊骨提取物(SLG．B)。高原鼢鼠捕于青海省海北州。復方塞隆膠囊骨提取物由本實驗室提取，先分離全：復方塞隆膠囊骨提取物對卵清白蛋白誘導小鼠免疫亢進的抑制作用 65骨，陰干，粉碎，混合取樣，去離子水煎煮提取，減壓濃縮，得干粉，冰箱保存備用。提取物主要成分為骨膠蛋白，蛋白含量大于75％。所得干粉溶于十倍量的水中超聲溶解、離心、取上清。所得上清加無水乙醇至終濃度為50％ ，靜置、待沉淀完全、離心、沉淀80℃烘干得50％ 部分。離心所得上清加無水乙醇至終濃度為90％ ，靜置、離心，沉淀部分烘干即得90％醇沉部分，此部分為本試驗所用有效部位。 

    方法與結果：小鼠遲發性超敏反應雌性BALB／c小鼠每組8只，分5組，分別是模型組、SLG—B高、中、低劑量組和陽性對照組，造模前一天開始給藥，給藥量見表1。0．5％DNFB取適量DNFB溶于丙酮：橄欖油=4：1的溶劑中終濃度0．5％ 。day 0：將0．5％ 的DNFB溶液用槍緩慢加到BALB／C雌鼠的后腳上致敏(每只后腳2O L)。次日加強一次。初次致敏后第9 d，用20 IxL 0．4％DNFB攻擊鼠左耳，內外兩側各1O L。攻擊后24～ 48 h后脫頸椎處死小鼠，8 mm打孔器打耳片稱重，以左右耳的差值作為腫脹度。結果見表1。測定結果以 ±s表示，采用單因素方差分析進行組間差異的比較。 

    復方塞隆膠囊骨提取物體內給藥對OVA誘導的小鼠免疫功能的影響 

    試驗結果：結果顯示，與未免疫組小鼠相比，OVA+CFA免疫小鼠的OVA特異性細胞增殖反應，產生免疫增強型細胞因子以及產生OVA特異性抗體的能力顯著提高。SLG．B體內給藥21 d對OVA誘導的小鼠淋巴結及脾臟淋巴細胞的OVA特異性增殖具有抑圖1 SLG．B體內給藥對小鼠外周淋巴細胞OVA特異性
增殖的影響。 

    體內給藥后，取不同組的淋巴細胞和脾細胞在體外再加抗原或不加培養時，均能產生一定量的IFN ，且給藥組與對照相比能夠降低細胞因子IFN的產生。IgG是血清中含量最高的抗體，在體液免疫中發揮重要作用。經SLG。B給藥后小鼠血清中抗體的含量有所降低。 

    通過對復方塞隆膠囊骨提取物的實驗研究中發現SLG．B具有很強的免疫抑制作用。在OVA小鼠免疫模型上，SLG．B體內給藥能抑制OVA誘導的特異性淋巴細胞增殖反應；通過免疫磁珠法分離脾細胞中的T細胞及抗原呈遞細胞(APC)進行體外培養，發現SLG—B對淋巴細胞增值的抑制作用主要是針對APC細胞的。同時觀察了SLG—B對OVA小鼠脾細胞因量子IFN產生的抑制作用，結果發現SLG—B可以明顯抑制小鼠腹脾細胞產生IFN一 (P<0．O5或P<0．o1)。我們的實驗還發現SLG—B治療組對OVA免疫小鼠血清中IgG抗體的產生有一定的抑制作用。說明SLG-B在免疫抑制起效過程中其作用靶點與APC及B淋巴細胞有關。 

    通過試驗發現SLG—B主要是通過抑制APC細胞來抑制免疫亢進發生的，從而達到抑制類風濕性關節炎。因此研究APC及其產生的細胞因子有助于進一步明確SLG．B的作用機制。 

    參考文獻：《塞隆骨提取物對卵清白蛋白誘導小鼠免疫亢進的抑制作用》　趙曉輝 岳會蘭 蔣福全 邵赟 梅麗娟 陶燕鐸   中國科學院西北高原生物研究所 西寧810008 中國科學院研究生院 北京100049　《天然產物研究與開發》2009年 第B05期

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