灰樹花——又名舞茸,是是擔子菌綱、多孔菌科的食、藥兼用蕈菌。本研究觀察灰樹花作用患瘤小鼠對移植性腫瘤的抑制作用,并對抗腫瘤作用的免疫機制進行初步探討。
實驗的材料與方法:
材料:
1、動物昆明小鼠體質量為l8~22 g,3—4周齡,雌性90只購自佳木斯大學實驗動物中心。
2、試劑灰樹花多糖針劑,含量>50% ,注射用環磷酰胺(CTX),抗T細胞單克隆抗體L3T4、Lyt-2以及FITC兔抗鼠IgG,小鼠肝腹水瘤細胞系(H22)。
方法:
建立模型本研究設實驗組(I、Ⅱ、Ⅲ劑量組)和患瘤模型對照組、陽性對照組(CTX),以及正常組,每組15只。灌胃3周后接種,制成模型。
對小鼠H22的抑制作用 實驗組按分別按照100、200、400 mg/kg灌胃給藥1次/d,陽性對照組給環磷酰胺100mg/kg,患瘤模型對照組給生理鹽水0.4 ml。計算抑瘤率。
脾臟T細胞亞群的檢測分離脾細胞,然后調整細胞濃度為1 X 10 個/ml,按照操作說明完成后滴片,求出熒光細胞百分率。
結果:
對小鼠H22的抑制:灰樹花多糖I、Ⅱ、Ⅲ組患瘤動物的瘤重與患瘤模型組相比均有明顯的抑制作用,陽性對照組亦有明顯的抑制作用(P<0.05)。
T細胞亞群的檢測荷瘤鼠的輔助性T細胞L3T4水平明顯下降,抑制性T細胞Lyt-2水平亦顯著下降,L3T4/Lyt-2比值極顯著下降。而灰樹花多糖Ⅱ、Ⅲ組恢復到正常小鼠水平。
討論:
本研究通過灰樹花多糖對患瘤鼠瘤重等影響的分析,從瘤體比的統計分析結果更能清楚地說明灰樹花多糖組的作用效果明顯優于陽性對照組。本研究發現患瘤鼠的L3T4和Lyt-2百分率均明顯下降,因此,L3T4/Lyt-2比值亦明顯下降。給予灰樹花多糖后L3T4和Lyt-2百分率均有明顯升高。L3T4百分率恢復到正常小鼠水平,L3T4/Lyt-2比值明顯升高。灰樹花多糖Ⅱ、Ⅲ組的L3T4/Lyt-2比值恢復到正常小鼠水平,表明灰樹花多糖具有改善患瘤鼠免疫功能的作用。因此,給予灰樹花多糖升高的Lyt-2或許是TCS表型,證明 L3T4在腫瘤免疫中是最為關鍵的效應細胞。