恩博克®乳膏(抗人白細胞介素-8單克隆抗體乳膏)研究資料匯編

恩博克®乳膏

（抗人白細胞介素-8單克隆抗體乳膏）

研究資料匯編

 

    銀屑病（psoriasis）是在特定遺傳背景下，通過多種因素而誘導而發生的慢性炎癥性皮膚病。在不同地區和人群中銀屑病的發病率有很大差異。白種人群的發病率超過2%，極端的接近5%。黃種人群的發病率較低，我國銀屑病科研協作組在1984年的調查結果表明，銀屑病的發病率為0.123%，其中尋常型銀屑病占97.98%，膿皰型和關節型均為0.69%，紅皮病型為0.58%，但多數皮膚病專家認為近幾年銀屑病的發病率有增加的趨勢。

銀屑病自Willan和Henra命名以來已有200多年的歷史，由于其發病機理仍然不清楚，導致雖然用于治療銀屑病的藥物眾多，但治療效果均不理想，且容易復發。

恩博克乳膏（抗人白細胞介素-8單克隆抗體乳膏）是根據近年來銀屑病發病機理的最新研究結果，即銀屑病的病患局部細胞因子水平異常使得出現皮膚銀屑病的病理變化的機理，而研制的特異治療銀屑病的藥物。恩博克乳膏（抗人白細胞介素-8單克隆抗體乳膏）可使銀屑病病患局部細胞因子水平恢復正常，消除銀屑病的病理變化，在細胞因子水平上達到有效治療銀屑病的目的。

 

    恩博克乳膏（抗人白細胞介素-8單克隆抗體乳膏）治療銀屑病的機理為，通過恩博克乳膏（抗人白細胞介素-8單克隆抗體乳膏）中的抗人白細胞介素-8單克隆抗體中和銀屑病病變局部異常增高的白細胞介素-8的生物學活性，封閉異常增高的白細胞介素-8的病理生理功能，在細胞因子水平上達到有效治療銀屑病的目的。

    在銀屑病病變局部的皮膚中，白細胞介素-8的水平為正常皮膚的100余倍。白細胞介素-8是細胞因子中稱之為化學趨向因子（或趨化因子）的一種蛋白分子，在趨化因子大家族中，按照它們分子結構中的半胱氨酸位置可分為C-X-C類趨化因子和C-C類趨化因子。白細胞介素-8屬于C-X-C類趨化因子，它是由72個氨基酸組成的，分子量為8000左右。白細胞介素-8是嗜中性粒性白細胞的強烈趨化和激活因子，能強力地匯集并激活嗜中性粒性白細胞。白細胞介素-8在許多生理及病理過程中具有廣泛的生物活性，它在炎癥過程中起著關鍵性的作用。白細胞介素-8由多種參與炎癥反應的細胞產生，如巨噬細胞、中性粒細胞、淋巴細胞和內皮細胞、角質形成細胞等等。它繼而作用于內皮細胞、中性粒細胞和T淋巴細胞，從而形成炎癥反應。

    白細胞介素-8與其在某些細胞表面的受體結合后，使靶細胞的功能發生一系列改變，引起一系列前炎癥病理生理反應，包括細胞粘附受體CD11b/CD18 （Mac-1）在中性粒細胞中表達增加、增強淋巴細胞對人內皮細胞的粘附，增加中性粒細胞的趨化性及脫顆粒作用，并促進血管生長因子表達和分泌，形成血管增生等。IL-8因能引起中性粒細胞浸潤并使其釋放溶酶體和過氧化陰離子而導致或促進組織損傷。在人類炎癥性疾病中，IL-8的表達和分泌明顯增加，特別是病變組織局部濃度過升高，例如，銀屑病、類風濕性關節炎、特發性肺纖維化、腸道炎癥、成年人呼吸窘迫綜合性、敗血癥休克等。

白細胞介素-8作為一種CXC類的化學趨化因子在銀屑病的病理機理中，主要有以下關鍵作用：

      1．白細胞介素-8在皮膚組織內過量表達和分泌，匯集大量嗜中性粒細胞、T淋巴細胞和其他炎癥細胞，對皮膚組織的浸潤，引起微膿腫和皮膚組織結構的損傷。嗜中性粒細胞、T淋巴細胞等也可以產生大量IL-8，而使局部病理改變加重，病變遷沿不易治愈。

      2．白細胞介素-8激活表皮角質化細胞，引起角質化細胞的異常增殖和角化不全，大量細胞壞死和皮屑脫落。

      3．白細胞介素-8激活的角質化細胞又在血管生成因子的異常表達過程起著重要作用。激活的角質化細胞具有正和負雙向缺陷，既過度產生IL-8使得血管生成因子產生增加，又下調血管生成抑制因子表達，使銀屑病灶區的血管生成處于失控狀態。大量血管形成為表皮細胞過量增生提供足夠血液，促進了炎癥的快速形成。

      4．白細胞介素-8的活性是通過它與其在嗜中性粒細胞或角質化細胞等炎癥性細胞表面的受體相結合而介導的。銀屑病病灶區的角質化細胞和浸潤的嗜中性粒細胞，不僅本身能產生大量IL-8而且誘導IL-8受體在細胞表面的表達引起連續不斷的惡化循環，造成持續不斷越來越嚴重的皮膚炎癥。

 

    恩博克乳膏中的抗人白細胞介素-8單克隆抗體是一種高效價特異性針對白細胞介素-8的中和性抗體，它能十分專一性地與白細胞介素-8結合，封閉白細胞介素-8的化學趨向活性等病理生理功能，從而阻斷嗜中性粒細胞和T淋巴細胞等炎癥細胞對皮膚組織的浸潤，阻斷血管生長因子和血管生成抑制因子在病變局部部位的過量表達和微血管生成，阻斷表皮角質化細胞的激活和異常增生及壞死，達到有效治療銀屑病的效果。

      治療用抗人白細胞介素-8單克隆抗體是用基因重組人體單核細胞來源的白細胞介素-8（72個氨基酸組成，分子量為8.0kd）免疫SPF級Balb/c小鼠，經雜交瘤技術篩選而得到的具有高度親和力并對I白細胞介素-8生物活性具有高度中和能力的單克隆抗體，其免疫球蛋白亞型鑒定為IgG1，Kappa型抗體。抗人白細胞介素-8單克隆抗體的生產過程中，嚴格控制質量，保證抗人白細胞介素-8單克隆抗體具有高度生物活性、高純度和無外源污染因子混入，保證銀屑病病患者在使用時安全有效。

 

    1.  抗白細胞介素-8單克隆抗體乳膏外用治療銀屑病六周后，病人體內HAMA反應（人抗鼠免疫球蛋白抗體）的檢測：

    鑒于恩博克乳膏中的抗人白細胞介素-8單克隆抗體是鼠源性單克隆抗體。大量臨床治療資料證明，注射鼠源性單克隆抗體后常常會引起機體產生抗鼠免疫球蛋白的反應（即HAMA）。因此，外用單克隆抗體的途徑是否也存在HAMA反應是必須加以闡明的，這不僅關系到抗體的療效，也關系到可能產生的不良副作用。

    我們在II/III期臨床試驗時，對46例銀屑病病人在治療前和治療6周后的血清進行了HAMA檢測，其檢測方法和結果如下：

 

    （1）HAMA試劑盒試劑（ELISA）。

    （2）HAMA標準曲線制備：

    用2mL蒸餾水充分溶解HAMA標準品使之濃度為400ng/mL，然后用標準品稀釋液，將其作倍比（2 X）系列稀釋至6.25ng/mL,即獲7個不同濃度之標準,供EIA使用。此7個不同濃度為：400ng/mL，200ng/mL，100ng/mL，50ng/mL,25ng/mL，12.5ng/mL，6.25ng/mL。

    （3）結果判斷：

    將標準品的濃度作為X軸，相應OD為Y軸，由此得到HAMA EIA標準曲線，將待測標本的OD在此標準曲線上查到相應的濃度，即為該標本HAMA EIA結果，凡結果低于50ng/mL為陰性結果。

    46例受測血清中僅一例治療前后均出現HAMA 20ng/mL—30ng/mL，但都在臨界值以下，所以HAMA呈陰性反應。其余45例血清均未檢測出HAMA反應。

    按照美國NIH報告，注射鼠源性單克隆抗體治療疾病，最早可在第8天就出現HAMA陽性反應（HAMA＞62.5ng/mL為陽性反應），一般可在治療后10—14天出現HAMA陽性反應。當病人體內出現抗鼠免疫球蛋白的抗體后，單克隆抗體的治療效果就會受到影響。而本實驗顯示，單克隆抗體外用治療不出現HAMA反應，所以，可以長期安全使用。

    乳膏中單克隆抗體是持續微量、緩慢地透入表皮皮損組織，與皮損組織中的白細胞介素-8直接結合，形成抗原-抗體復合物，并可能在皮膚局部被降介或消化。所以，未與白細胞介素-8結合的游離態單克隆抗體或抗原-抗體復合物進行血液中是極為微量的。微量抗體分子持續、緩慢地進入體內，可能誘導機體免疫系統的免疫“遺漏”或“耐受”，抑制了HAMA的產生。  

 

皮膚刺激性：

    在動物試驗（家兔、豚鼠）和人體試驗中，破損皮膚使用恩博克乳膏后，均無明顯變化，提示恩博克乳膏對皮膚無刺激性作用和無致敏作用。

 

對同源性細胞因子功能的影響：

    特異性鑒定結果證明，抗人白細胞介素-8單克隆抗體與其他細胞因子、化學趨向因子GM-CSF 、TGF-β 、MCAF、TNF-α、 IL-7、 IL-1β、 b-FGF、 IL-16、 MCP-3、 M-CSF、 EGF以及與IL-8結構上同源的細胞因子GROα、 PF-4、 ENA78、 NAP-2 、GCP2均無交叉反應，故抗人白細胞介素-8單克隆抗體不會干擾同源性細胞因子的功能。

 

    II/III期臨床試驗表明，外用恩博克乳膏安全性高，患者耐受性好。不良反應有局部刺激、紅斑等，多數呈輕度，不影響對銀屑病的治療。局部不良反應發生率為7.56%，與對照組（8.69%）比較，無統計學差異。無全身不良反應發生。

 

典型病例

    例1  朱某，男性，48歲，2000年4月24日就診。病史：全身皮膚發生紅斑、脫屑，輕度癢感已1個半月。發病前半個月曾經感冒、發燒、咽部疼痛。近來因工作緊張病后未曾治療。既往身體健康，從未患過類似疾病，家族中亦無類似疾病發病史。檢查：軀干、四肢（伸側為主）散在甲大、指頭大紅斑，輕度浸潤，上覆銀白色鱗屑。薄膜現象，點狀出血現象陽性。診斷：尋常性銀屑病，進展期。皮損面積約占體表面積10%左右。病情評分為9分。予以白細胞介素—8單抗乳膏（揭盲得知）每日二次，外搽治療。用藥1周后已不癢，鱗屑明顯減少，2周后顯著好轉，用藥3周紅斑、鱗屑性皮疹消失，殘留明顯的色素沉著，用藥4周即停止用藥。至第6周色素沉著亦減輕，痊愈（照片NO.54）。療程中無不良反應發生，治療前后進行了血、尿常規、肝腎功能及心電圖檢查，均無異常出現。

    例2  李某，男，59歲，病史：全身皮膚發生脫屑性紅斑已20年。病程中有時輕有時重，但與季節無明顯關系。5年前曾接受氨甲喋呤片劑口服治療，約1個月后皮疹消退，此后未再復發。直至4個月前自己認為吃海蝦后復發，此后皮疹逐漸增多、擴大，有明顯的癢感，既往身體健康，除皮膚病外，未患過其它明顯疾病，本病亦無家族發病史。檢查：頭皮、上肢、臀部散在與密集指頭大、錢幣大及掌心大小的紅色斑塊，上覆銀白色鱗屑、薄膜現象及點狀出血現象陽性。診斷：尋常性銀屑病，進展期，皮損面積約占體表面積10%左右，病情評分為15分，予以隨機號G4的乳膏，每日二次，外搽治療。用藥1周后癢感和鱗屑明顯減輕，4周后已顯著改善，至第6周皮疹基本消退，達到基本痊愈（照片N0.5）。療程中無不良反應發生。治療前后檢查血、尿常規、肝腎功能和心電圖，均無異常。揭盲得知為治療藥。

    例3  蔡某，男，51歲，2000年4月5日就診。病史：頸部、上肢鱗屑性紅斑，伴瘙癢2月，2000年2月初，因勞累后，頸部、雙上肢出現散在鱗屑性紅斑，伴瘙癢，每天需搔抓4-6次，此次就診前未治療過。既往體健，家族中無類似病人。檢查；頸部、雙上肢散在黃豆或甲蓋大小紅色斑塊，表面覆蓋較多銀白色鱗屑，輕刮則脫落，再刮有點狀出血。診斷：尋常型銀屑病（小斑塊狀），進行期，皮損面積約占體表面積10%，病情評分為12分。予以抗人白細胞介素—8乳膏治療（揭盲得知），每日外用2次。6周后，癥狀、體征全部消失，臨床治愈。治療過程中未見不良反應，治療前后血、尿常規，肝腎功能、心電圖無異常。

例4  葉某，女，46歲，2000后3月31日就診。病史：軀干、四肢反復起鱗屑性紅斑。伴瘙癢8年余。勞累后易復發，用過多種中西藥治療，效果不佳。2月前，因發生婚變，皮疹復發，伴劇癢，遂來本院就診。既往體健，家族中無類似病人。查體：軀干、四肢散在鱗屑性紅斑、丘疹，Auspitz征陽性。診斷：尋常型銀屑病，進行期，皮損面積約占體表面積20%，病情評分為14分。予以抗人白細胞介素—8乳膏治療（揭盲得知），每日外用2次，輕揉數分鐘。1周后，瘙癢減輕，脫屑減少。4周后病情明顯減輕，疾病評分為5分；6周后，皮疹消退，僅見色素斑或淡紅斑，癥狀消失，疾病評分降為3分。治療過程中未見不良反應，治療前后血、尿常規，肝腎功能、心電圖無異常。