靈芝孢子粉在治療重癥急性胰腺炎方面的作用

   重癥急性胰腺炎(SAP)是一種嚴重危害人類健康的疾病，病情兇險，病死率高，為臨床常見急腹癥之一。在其治療方面仍以非手術治療為主，西藥和中藥各有優(yōu)勢。

    重癥急性胰腺炎(SAP)是一種嚴重危害人類健康的疾病，病情兇險，病死率高，為臨床常見急腹癥之一。在其治療方面仍以非手術治療為主，西藥和中藥各有優(yōu)勢。本研究旨在探討靈芝孢子粉和奧曲肽合用的效果，以期為臨床治療提供新思路。

　　1  材料與方法
　　1.1  材料  動物：選擇成年SD大鼠70只，雌雄各半，體重為220g～280g，由佳木斯大學動物中心提供。藥物與試劑：牛磺膽酸鈉，美國Sigma公司；奧曲肽，印度太陽藥業(yè)有限公司；靈芝孢子粉，上海康舟真菌多糖有限公司；淀粉酶（AMS）測定試劑盒，南京建成生物工程研究所；鱟試劑測試盒：上海伊華臨床醫(yī)學科技公司。主要儀器：多管架自動平衡離心機，長沙湘儀離心機儀器有限公司；760CRT雙光束紫外可見分光光度計，上海精密科學儀器有限公司。

　　1.2  方法
　　1.2.1  動物分組及模型制備  將70只大鼠隨機分為五組，每組14只：Ⅰ組為假手術組，Ⅱ組為SAP模型組（簡稱模型組），Ⅲ組為奧曲肽治療組（簡稱奧曲肽組），Ⅳ組為靈芝孢子粉治療組（簡稱靈芝組），Ⅴ組為靈芝孢子粉和奧曲肽聯(lián)合治療組（簡稱奧靈聯(lián)合組）。術前均禁食12h，自由飲水。25%烏拉坦溶液腹腔注射麻醉（4ml/kg）。將其常規(guī)備皮、消毒鋪巾后，沿腹白線切開入腹，沿十二指腸找到胰腺，確認膽胰管。先將肝門處膽總管暫時結扎，然后在膽胰管開口十二指腸系膜緣對側腸壁上選一無血管區(qū)，用微量注射器（4號針頭）穿刺進入膽胰管1cm 左右，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組均以0.1ml/min的速度緩緩推入5%牛磺膽酸鈉(ST)0.1ml/100g，推注結束后，拔出注射器輕壓穿刺點處持續(xù)10min，然后解除肝門處結扎，并確認腹腔無破損；逐層關腹即可。Ⅰ組僅注入生理鹽水，劑量和速度同牛磺膽酸鈉。

    1.2.2  給藥方法  （1）各組動物均于術后即時開始給藥；（2）Ⅰ、Ⅱ組僅給予生理鹽水1ml/100g灌胃，2次/ d；（3）Ⅲ組除生理鹽水1ml/100g灌胃外，腹腔注射奧曲肽10μg/kg，2次/d；（4）Ⅳ組除補充生理鹽水外，靈芝孢子粉灌胃2g/kg，2次/d；（5）Ⅴ組在補充生理鹽水，腹腔注射奧曲肽的同時，靈芝孢子粉灌胃2g/kg，2次/d。

    1.2.3  血清淀粉酶(AMS)含量的檢測  各組大鼠于術后6h、12h、24h分別檢測AMS含量。用乙醚將大鼠淺麻醉后，從其眼內眥靜脈處取血，裝于潔凈試管內，3000rpm離心10min，取血清檢測。具體操作步驟按淀粉酶測定試劑盒說明書進行。計算公式為：   
    血清淀粉酶AMS（u/dL）=（空白管吸光度-測定管吸光度）/空白管吸光度×800

    1.2.4  血漿內毒素含量的檢測  大鼠斷髓后，將其固定放于超凈工作臺內，充分暴露心臟，直視下用無菌注射器采集心臟血置于無菌肝素化的試管中，500rpm離心5min后，取血漿置于無熱源試管中待檢，其它操作步驟嚴格按照說明書進行。按計算公式A=As-（Ab-Abb）求得吸光度A值，再查對內毒素標準曲線求得內毒素含量。

　　1.2.5  胰腺組織病理學檢查  取出動物胰腺組織，用 10%福爾馬林溶液固定，石蠟包埋切片，HE染色后，用光鏡觀察。

    1.2.6  數據統(tǒng)計分析方法  將各組存活動物的所有實驗數據都以 “均數±標準差（x±s）” 表示，應用SPSS10.0 統(tǒng)計學軟件，采用兩樣本t檢驗和多個處理組間單因素方差分析，P<0.05有統(tǒng)計學意義。

    2  結果
    2.1  AMS含量的檢測結果
    2.1.1  模型組與假手術組AMS的定量檢測  正常大鼠循環(huán)血中含有一定量的淀粉酶，SAP時血清淀粉酶含量顯著上升（P<0.05）。
    2.1.2  各治療組與模型組AMS的定量檢測  奧曲肽組和奧靈聯(lián)合組均能使血清淀粉酶含量明顯下降，與模型組、靈芝組相比，差異顯著（P<0.05），說明在降低血清淀粉酶方面這兩組均有效，且與奧曲肽組比較，奧靈聯(lián)合組效果更好（P<0.05）。靈芝組在6h、12h時，血清淀粉酶含量與模型組比較，無統(tǒng)計學意義（P>0.05），在24h時可降低其含量（P<0.05），說明單用靈芝孢子粉不能及時有效降低血清淀粉酶。
    在各組間進行顯著性比較時，假手術組用 “JS” 表示，模型組用 “MX” 表示，奧曲肽組用 “AQ” 表示，靈芝組用 “LZ” 表示，奧靈聯(lián)合組用 “AL” 表示

    2.2  血漿內毒素含量的檢測結果
    2.2.1  模型組與假手術組血漿內毒素含量的定量檢測  假手術組大鼠體循環(huán)內存在極微量的內毒素，SAP模型組與假手術組相比，血漿內毒素含量明顯升高（P<0.05）。

    2.2.2  各治療組與模型組血漿內毒素含量的定量檢測  各治療組與模型組比較，均能使血漿內毒素水平降低（P<0.05）；奧靈聯(lián)合組與其他治療組相比，效果更明顯，差異顯著（P<0.05），說明在降低內毒素水平方面，靈芝孢子粉與奧曲肽合用效果更好。

    2.3  胰腺組織病理學檢查結果  SAP模型組胰腺結構不清，點狀或局灶性壞死；炎性細胞大量浸潤,紅細胞滲出極明顯。經奧曲肽和靈芝聯(lián)合應用治療后，病變明顯減輕。

    3  討論 
    重癥急性胰腺炎發(fā)病機制復雜，隨著腸屏障功能受損，引起細菌及內毒素移位，從而造成胰腺及胰周壞死感染［1］。在SAP病程中，由于多種因素可造成腸缺血，腸壁血管通透性增加，乃至發(fā)生腸麻痹腸梗阻，繼發(fā)腸道細菌過度生長和腸黏膜屏障破壞，一方面腸道細菌移居至壞死胰腺組織和其他臟器并釋放內毒素，另一方面腸道內毒素通過受損的腸黏膜屏障吸收，導致內毒素血癥。內毒素既可加重原有胰腺損害，又可誘發(fā)全身代謝和血液動力學紊亂，參與多種并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展，嚴重影響胰腺炎患者的預后［2］。臨床觀察表明，內毒素血癥的程度與急性壞死型胰腺炎的嚴重度密切相關。因此，促進腸蠕動，調整腸道微生態(tài)，加強內毒素排泄，保護腸道屏障功能，從而減輕內毒素血癥成為急性胰腺炎治療的有效手段之一。

    奧曲肽是臨床治療胰腺炎的常用藥，其能迅速、有效地阻止胰酶的釋放和活化，阻斷胰腺自身組織的消化［3］。靈芝孢子粉是靈芝的繁殖器官，集中了靈芝的精華，因而具有比靈芝更好的藥理作用。現(xiàn)代研究已證實了靈芝孢子粉具有抗癌、免疫、保肝、抗炎、清除自由基、活血化瘀和改善胰臟血液循環(huán)等功能［4��5］。本研究結果顯示，經靈芝孢子粉與奧曲肽聯(lián)合應用治療后，胰腺腺泡明顯恢復。因此推測其SAP的機制可能為：保護腸道屏障功能、活血化瘀、保護胰腺細胞等。

    【參考文獻】
    ［1］ 龍躍平，肖谷欣.營養(yǎng)治療途徑對急性胰腺炎患者胰床感染的影響［J］.中國普通外科雜志，1999，3(8)：181.
　　［2］ Windsor JA， Fearon KC， Ross JA， et al. Role of serum endotoxin and antiendotoxin core antibody levels in predicting the development of MOF in acute pancreatitis［J］. Br J Surg，1993，80(8)：1042��1046.
　　［3］ Binder M，Uhl W，F(xiàn)riess H，et al. Octreotide in the treatment of acute pancreatitis. results of a multicenter prospective trial with three different octreotide dosages ［J］. Digestion，1994，55(Suppl 1)：20.
　　［4］ 金春花，等.靈芝多糖活血化淤作用實驗研究［J］.中草藥，1998，29(7)：470.
　　［5］ 章靈華，肖培根.靈芝抱子粉提取物對實驗性糖尿病的防治作用［J］.中草藥，1993，24(5):246��247，272.

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