龜齡集膠囊對(duì)少精癥模型大鼠的生精作用及對(duì)性激素的影響

謝建興， 王峻， 陳銘， 劉鴻( 廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科，廣東廣州510405)

摘要:【目的】觀察龜齡集膠囊對(duì)棉子油所致少精癥模型大鼠的生精作用及其對(duì)性激素水平的影響。【方法】以灌服棉子油法復(fù)制少精癥大鼠模型，以五子衍宗丸( 劑量為1 g·kg － 1·d － 1 ) 為對(duì)照，觀察龜齡集( 劑量為54 mg·kg － 1·d － 1 ) 對(duì)少精癥模型大鼠的精子數(shù)量和密度的影響，采用放射免疫法測(cè)定血清性激素睪酮( T) 、促黃體生成激素( LH) 、促卵泡生長(zhǎng)激素( FSH) 的含量。【結(jié)果】龜齡集組能顯著提高少精癥大鼠的精子數(shù)目和密度( 均P ＜ 0. 05) ，與傳統(tǒng)的五子衍宗丸比較無顯著性差異( P ＞ 0. 05) ，能降低LH 含量和提高FSH 含量，與模型組比較有顯著性差異( 均P ＜ 0. 05) ，其作用與五子衍宗丸相類似。龜齡集組對(duì)T 水平無顯著影響，與五子衍宗丸組比較有顯著性差異( P ＜ 0. 05) ，與模型組比較無顯著性差異( P ＞ 0. 05) 。【結(jié)論】龜齡集能夠顯著提高精子數(shù)量和密度，其作用機(jī)理可能是通過負(fù)反饋抑制作用而增加垂體FSH分泌和降低LH 分泌，從而達(dá)到促進(jìn)生殖細(xì)胞分化成熟精子的作用。

關(guān)鍵詞: 龜齡集/藥理學(xué); 少精癥/中藥療法; 性激素/血液; 疾病模型，動(dòng)物; 大鼠

龜齡集是在“老君益壽散”的基礎(chǔ)上加減而成的一種中藥復(fù)方升煉劑。其組方集動(dòng)物藥( 鹿茸、海馬、雀腦等) 、植物藥( 人參、天冬、杜仲等) 、礦物藥( 大青鹽、石燕等) 28 味于一爐。文獻(xiàn)學(xué)研究表明，謝民等［1］通過計(jì)算歷代醫(yī)家遺留下來的77 個(gè)抗衰老處方( “長(zhǎng)青益壽丹”、“延齡固本丹”、“延年丸”等) 的抗衰老隸屬度得出:龜齡集是以補(bǔ)陽(yáng)為主，兼以治療健忘而達(dá)到延緩衰老，使人延年益壽的作用。本研究觀察了該方對(duì)少精癥模型大鼠的生精作用及性激素水平的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1. 1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF 級(jí)SD 雄性大鼠43 只( 2 月齡) ，體質(zhì)量( 230 ± 20) g，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供( 合格證號(hào): 0034559) 。

1. 2 藥品、試劑與儀器龜齡集膠囊( 山西廣譽(yù)遠(yuǎn)國(guó)藥有限公司，批號(hào): 20090331) ; 五子衍宗丸( 北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠，批號(hào):9035078) ; 睪酮( T) 、促黃體生成激素( LH) 、促卵泡生長(zhǎng)激素( FSH ) 試劑盒( 批號(hào):20091025，由北京科美東雅生物技術(shù)有限公司提供) ; SN-695B 型放免Y 測(cè)量?jī)x( 上海日環(huán)儀器一廠) ; L2000A 型精子分析儀( 哈爾濱海慈醫(yī)療器械公司) 。

1. 3 模型復(fù)制［2］ 隨機(jī)抽取33 只大鼠，灌服棉子油6 mL /kg，每天1 次，連續(xù)14 d，第21 天處死大鼠檢測(cè)精子數(shù)和精子活力。

1. 4 動(dòng)物的分組及給藥正常組給予生理鹽水灌胃10 mL /kg; 模型組以棉子油造模+ 生理鹽水10mL /kg 灌胃; 龜齡集組以棉子油造模+ 龜齡集54mg·kg － 1·d － 1 灌胃; 五子衍宗丸組以棉子油造模+ 五子衍宗丸1 g·kg － 1·d － 1 灌胃。以上各組均每天給藥，連續(xù)14 d。21 d 后取眶后靜脈叢采全血5 mL，離心; 采血后處死動(dòng)物，摘取雙側(cè)附睪。

1. 5 檢測(cè)項(xiàng)目于第21 天處死大鼠，測(cè)定大鼠附睪精子數(shù)和精子密度，附睪精子數(shù)測(cè)定采用精子分析儀檢測(cè)計(jì)算，以清華同方精子檢測(cè)軟件統(tǒng)計(jì)分析; 測(cè)定靜脈血FSH、LH、T 含量采用放射免疫法，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)核醫(yī)學(xué)室進(jìn)行檢測(cè)。

1. 6 統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS 13. 0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。

2 結(jié)果

2. 1 各組對(duì)大鼠附睪精子活動(dòng)數(shù)和精子密度的影響表1 結(jié)果顯示: 模型組精子活動(dòng)數(shù)和精子密度顯著降低( 與正常組比較，均P ＜ 0. 05) ; 龜齡集組與五子衍宗丸組均可顯著升高精子數(shù)與精子密度，與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05) 。

2. 2 各組對(duì)大鼠血清T、LH、FSH 含量的影響表2 結(jié)果顯示: 模型組LH、FSH 含量顯著升高( 與正常組比較，均P ＜ 0. 05) 、T 含量無顯著變化( P ＞ 0. 05) ; 龜齡集組及五子衍宗組可降低LH 含量、升高FSH 含量，與模型組比較有顯著性差異( 均P ＜ 0. 05)

3 討論

龜齡集具有助陽(yáng)溫腎、大補(bǔ)真元的功能，臨床多用于命門火衰，腎精不足，氣血虧損引起的陽(yáng)痿、遺精、腎寒精冷、腰酸腿軟等癥［3］。本研究結(jié)果顯示: 以灌服棉子油法能造成大鼠精子數(shù)目和密度顯著減少，復(fù)制大鼠少精癥模型，說明造模是成功和可行的。龜齡集膠囊能顯著提高少精癥大鼠的精子數(shù)目和密度，與傳統(tǒng)的五子衍宗丸比較無顯著性差異，表明兩種藥物對(duì)少精癥的效果相仿。

睪丸的生精功能受下丘腦—腺垂體—睪丸軸內(nèi)分泌激素水平的調(diào)控。在對(duì)性激素的影響上，模型組的LH 和FSH 含量均較正常組升高，有顯著性差異。FSH、LH 均為垂體分泌的糖蛋白類激素，FSH與曲細(xì)精管的支持細(xì)胞膜受體結(jié)合，刺激性激素結(jié)合球蛋白的生成，高濃度的性激素結(jié)合球蛋白使曲細(xì)精管腔內(nèi)的睪酮維持在較高水平，以促進(jìn)生殖細(xì)胞分化成熟的精子［4］。說明棉子油對(duì)精子的影響可能是由于造成睪丸支持細(xì)胞—曲細(xì)精管復(fù)合體的損傷，致使支持細(xì)胞受損或功能降低，不能分泌足夠的抑制素來調(diào)節(jié)FSH 濃度。龜齡集膠囊與模型組的FSH 濃度上比較有顯著性差異，FSH 受支持細(xì)胞分泌的抑制素的負(fù)反饋調(diào)節(jié)，如果支持細(xì)胞病變或受損，就會(huì)引起抑制素分泌減少或缺乏，而致FSH 選擇性升高［5］。此作用可能是通過反饋性增加FSH 分泌而達(dá)到提高精子數(shù)量和密度的作用，龜齡集的作用機(jī)理可能與五子衍宗丸的作用相類似。

LH主要促進(jìn)睪丸間質(zhì)細(xì)胞增生，刺激間質(zhì)細(xì)胞合成和分泌睪酮，以供精子生成的需要。LH 可協(xié)同FSH 促進(jìn)精子成熟，并與精子活動(dòng)力有關(guān)。模型組LH 含量較正常組升高，有顯著性差異，說明棉子油能引起LH 反應(yīng)性增加，而龜齡集組和五子衍宗丸組在LH 的升高幅度上較模型組低，有顯著性差異，說明此兩種藥物可能是通過減少LH 分泌，反饋性地抑制其過度分泌。

最近一項(xiàng)隨機(jī)對(duì)照實(shí)驗(yàn)表明FSH 和LH 都能獨(dú)立維持精子的發(fā)生，龜齡集的作用可能通過負(fù)反饋抑制作用而達(dá)到增加垂體FSH 分泌和降低LH分泌的目的。

五子衍宗丸可以顯著提高血清中的T 含量，提示可能是通過提高T 水平來保持精子數(shù)量和密度，此作用與龜齡集比較有顯著性差異，說明龜齡集并不是以提高T 水平來提高精子數(shù)量和密度的。龜齡集組T 含量與模型組比較差異無顯著性意義，說明龜齡集對(duì)T 含量無明星影響，顯示龜齡集生精作用可能并不是以提高睪酮來實(shí)現(xiàn)的。Vandekerckhove等對(duì)11 個(gè)隨機(jī)對(duì)照實(shí)驗(yàn)進(jìn)行循證分析，結(jié)果顯示在改善精液參數(shù)上，沒有足夠的證據(jù)表明雄激素治療是一種療效明顯的方法。同時(shí)臨床研究顯示:睪丸功能受損輕而未達(dá)到不可逆的程度時(shí)，血清和精液T 水平應(yīng)該是不改變的。本研究結(jié)果也支持了上述觀點(diǎn)。

總之，龜齡集能夠顯著提高精子數(shù)量和密度，作用與五子衍宗丸相仿。其作用機(jī)理可能是通過負(fù)反饋抑制作用而增加垂體FSH 分泌和降低LH 分泌，達(dá)到促進(jìn)生殖細(xì)胞分化成成熟精子的作用。

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