鶴蟾片對人肺腺癌細胞株增殖和凋亡的影響

    抑制腫瘤細胞增殖，誘導其分化，促進細胞凋亡，一直是腫瘤臨床及基礎研究的熱點之一。全反式維甲酸的應用推動了這一領域的進展，涌現(xiàn)了一批誘導分化劑，但由于嚴重的副作用，限制了其臨床應用。有研究表明，許多中藥或其有效成分同樣具有良好的抑制腫瘤細胞增殖和誘導其分化作用，且無副作用或較小。目前單體、提取物和單味藥的研究比較深入，復方研究的水平有待提高。鶴蟾片是在臨床上用于治療腫瘤的中成藥，為進一步了解其抗腫瘤機理，我們研究了鶴蟾片含藥血清對人肺腺癌細胞株(LAC)增殖和凋亡的影響。 

    動物和細胞株 230～250 g SD大鼠16只，雌雄各半，由廣州中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，合格證號：001A056。人肺腺癌細胞株(LAC)由廣州軍區(qū)總醫(yī)院分子腫瘤學研究所細胞室提供。 

    藥物中藥鶴蟾片，批號為D009，由中一藥業(yè)股份有限公司提供(由仙鶴草、干蟾皮、天冬、浙貝母、人參等組成)。鶴蟾片加蒸餾水配成0．341 4 kg／L濃度的混懸液備用。 

    腫瘤的發(fā)生不僅與腫瘤細胞增殖加快有關，而且與腫瘤細胞死亡受抑制密切相關，細胞凋亡(apoptosis)是細胞在生理或病理條件下主動啟動相關凋亡基因而發(fā)生的一種死亡形式。近來的研究表明，大多數(shù)化療藥物均可通過細胞凋亡途徑殺滅腫 

    瘤細胞。但化療藥物的毒副作用限制了其臨床應用，因此植物抗癌成分及中藥復方受到人們極大關注。目前中醫(yī)藥調節(jié)腫瘤細胞的增殖與分化，誘導腫瘤細胞凋亡已成為當前抗腫瘤研究的熱點，從細胞凋亡角度來認識惡性腫瘤的中醫(yī)藥治療，對于進一步揭示中醫(yī)藥的作用機制，提高l臨床療效具有重要意義。 

    中醫(yī)認為正氣內虛，邪毒內侵，是腫瘤發(fā)生和發(fā)展的主要原因；扶正固本，解毒化痰祛瘀是消除癌瘤的重要措施。氣陰兩虛型是中晚期肺癌的主要證型。中藥鶴蟾片正是遵照這一原則開發(fā)出來的復方制劑。該方由仙鶴草、干蟾皮、天冬、浙貝母、人參等藥物組成，既能清熱解毒、化瘀散結，又兼補益正氣、扶正固本，促使機體正氣恢復，抑制腫瘤生長。臨床應用結果證實對腫瘤治療具有一定療效。本研究中經(jīng)鶴蟾片含藥血清作用后的LAC細胞，倒置相差顯微鏡下見細胞體積縮小，核裂解，細胞貼壁能力下降；經(jīng)AO染色，熒光顯微鏡下細胞核呈致密濃染的塊狀或顆粒狀橘黃色熒光，較之對照組有明顯的差異。流式細胞儀可定量分析細胞的凋亡情況， 

    本研究通過設立空白對照組和空白血清組，較好地排除了培養(yǎng)體系中營養(yǎng)及血清的限制、有毒物質和代謝廢物積累、氧耗盡、流體力學應激等引起的凋亡，結果顯示鶴蟾片含藥血清處理后，LAC細胞呈現(xiàn)一系列凋亡特征改變，揭示其可抑制LAC腫瘤細胞增殖，對細胞凋亡具有一定的促進作用。抑制腫瘤細胞增殖，誘導其分化，最終使其發(fā)生凋亡，可能是鶴蟾片抗腫瘤作用的主要機制，由于細胞凋亡的啟動可能存在多個調控點，鶴蟾片具體機制還有待進一步研究。 

    (本文節(jié)選自《鶴蟾片含藥血清對人肺腺癌細胞株增殖和凋亡的影響》

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