氫溴酸加蘭他敏貼劑體外釋藥性和經皮滲透性能研究

    氫溴酸加蘭他敏最初適用于逆轉神經肌肉阻滯、小兒麻痹后遺癥及重癥肌無力的治療，后被開發成為輕中度AD治療藥物，目前楊森公的產品力益臨已經在全球40多個國家上市。作為一種治療輕中度AD的新型藥物，氫溴酸加蘭他敏具有針對膽堿能系統的雙重作用機制，既調節煙堿受體又抑制乙酰膽堿酯酶。

    本文研究的對象為氫溴酸加蘭他敏貼劑，該貼劑采用親水性高分子材料為基質，戰勝了親脂性高分子材料作為壓敏膠貯庫層需采用低極性有機溶劑的缺陷，有利于呵護和人員健康。體外藥物釋放和經皮滲入機能研究是經皮給藥制劑藥學機能研究的主要內容，是以本文對該貼劑的體外藥物釋放和經皮滲入機能進行了研究。

　　 1 材料與體例

　　1.1 儀器

　　CP225D型十萬分之一 電子 天平(德國Sartorius公司);CP324S型萬分之一電子天平(德國Sartorius公司);HP8453型紫外可見分光光度計(美國惠普公司);Agilent 1100高效液相色譜儀四元梯度泵(G1311A)，在線脫氣機(G1322A)，自動進樣器(G1313A)，柱溫箱(G1316A)， DAD檢測器(G1315A)，化學工作站(Rev. A.09.01)，(美國Agilent公司);TK��20A型透皮擴散試驗儀(上海鍇凱科技商業有限公司);pHS��3C型酸度計(上海偉業儀器廠)。

　　1.2 試藥

　　氫溴酸加蘭他敏對照品宜昌市夜明珠自然植物制品有限公司，純度99.25%，批號20040901;甲醇、乙腈:色譜純，德國，Merck;其他試劑均為剖析純，購自國內供給商;氫溴酸加蘭他敏貼劑:廉價，藥物含量為1.7 mg·cm-2;該貼劑由背襯層、藥庫層、壓敏膠層和防粘層組成，其中藥庫層由氫溴酸加蘭他敏、水溶性高分子材料基質和增塑劑組成，壓敏膠層由氫溴酸加蘭他敏、壓敏膠和透皮促滲劑組成。

　　1.3 離體皮膚制備

　　將家豬(3月齡，體質量約35 kg，購于廣州市太和家禽批發市場)背部區域的毛剔失蹤，剝離皮膚，去除皮下脂肪、組織和毛細血管。將措置好的皮膚剪成直徑為2.4 cm的圓形小塊并夾于鋁箔中，放入-20 ℃的冰箱中備用。嘗試前將皮膚掏出，于心理鹽水中解凍，用濾紙吸干后當即使用。

　　1.4 藥物釋放試驗

　　將貼劑剪成圓形，揭去呵護層，把貼堅貞定在改良Franz擴散池(容積為7 mL，有用接觸面積為3.14 cm2)上、下兩室之間，釋放面手下。接管室中以蒸餾水為接管液，接管液與貼劑慎密親密接觸。擴散池置于恒溫水浴輪回箱中連結32 ℃，接管室中置磁力攪拌子，以250 r/min轉速不竭攪拌。在0.5、1、2、4、6、8、10、12、14、24、36 h從接管室取樣2 mL，取樣后填補相等體積相等溫度的空白釋放介質。測定樣品溶液濃度并按公式(1) 計較 累積釋放量(Qn,μg·cm-2)。以累積釋放量Qn對時刻(t，h)和時刻的平方根(t1/2，h1/2)分袂進行零級擬合和Higuchi擬合，擬合方程的斜率為釋放速度J(零級擬應時單元為μg·cm-2·h-1;Higuchi擬應時單元為μg·cm-2·h-1/2)。

　　Qn=CnV+∑n-1i=1CiVsS(1)

　　式中Cn為第n個時刻點的被測液質量濃度(μg/mL)，Ci為第i個時刻點的被測液質量濃度(μg/mL)，Vs為取樣體積(mL)，V為溶出介質體積(mL)，S為有用接觸面積(cm2)。

　　1.5 經皮滲入試驗

　　將皮膚置于改良Franz擴散池(容積為7 mL，有用接觸面積為3.14 cm2)杯口上，角質層向上。揭去貼劑防粘呵護層后將黏性面粘貼于皮膚角質層上，蓋上供藥池。接管池中以體積分數30%乙醇為接管液，接管液與皮膚真皮層慎密親密接觸。擴散池置于恒溫水浴輪回箱中連結32 ℃，接管池中置磁力攪拌子，以250 r/min轉速不竭攪拌。在4、6、8、10、12、14、24、36 h從接管池取樣1 mL，取樣后填補相等體積相等溫度的空白釋放介質。測定透皮接管液濃度并按公式(1)計較累積滲入量(Qn, μg·cm-2)。以累積滲入量Qn對時刻(t，h)進行線性回歸，所得直線斜率為透皮速度J (μg·cm-2·h-1)，所得直線在時刻軸上的截距為透皮時滯tlag(h)。

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　　1.6 樣品溶液濃度測定

　　藥物釋放試驗中樣品溶液濃度的測定采用一階導數光譜法以286 nm處波峰和294 nm處波谷間的振幅為指標，用尺度曲線法進行定量。經皮滲入試驗中樣品溶液濃度的測定采用高效液相色譜法以峰面積為指標用外標法進行定量;其中色譜前提為色譜柱為Alltima Phenyl (250 mm×4.6 mm,5 μm)，流動相為乙腈�擦姿猁}緩沖液(20 mmol/L磷酸二氫鉀水溶液1 000 mL加三乙胺1.4 mL，用磷酸調pH至3.3)(體積比8∶92)，流速為0.65 mL/min，柱溫為30 ℃，檢測波長為210 nm，進樣量為20 μL。

　　 2 結不美觀與談判

　　2.1 樣品溶液濃度測定

　　采用一階導數光譜法測定藥物釋放試驗中樣品溶液濃度的體例簡單、快捷和切確;氫溴酸加蘭他敏濃度在13～130 μg·mL-1規模內線性精采(r=0.999 9，n=6);體例平均收受接管率為97.23%，RSD為1.12%。經皮滲入試驗中樣品溶液濃度低(達到 ng·mL-1級)而且樣品含有無法消弭干擾領受的雜質，是以采用高效液相色譜法測定(1);結不美觀剖明該體例氫溴酸加蘭他敏進樣量在4.524 ～ 904.8 ng規模內與峰面積線性關系精采(Y=0.11X，r2=1.000，n=10)，氫溴酸加蘭他敏在48 h內不變性好(RSD=0.72%，n=5)，體例一再性好(RSD=0.72%，n=5)，慎密度高(RSD=0.72%，n=5)。

　　2.2 藥物釋放機能

　　釋放度是權衡經皮給藥系統藥物釋放能力的首要參數。在經皮給藥系統中，藥物首先從貯庫中釋放出來，達到皮膚概況，進而經皮滲入進入體內闡嚴重染。本文采用擴散池法對氫溴酸加蘭他敏透皮貼劑鄧曄著度進行了測定，結不美觀剖明該貼劑(藥物含量為1.7 mg·cm-2)24 h的累積釋放量均跨越95%;釋放曲線(圖2)顯示藥物在初始階段快速釋放，而在后階段釋放速度削減但相對不變;擬合結不美觀(表1)剖明，氫溴酸加蘭他敏貼劑鄧曄著曲線合適Higuchi方程，即藥物鄧曄著量與時刻的平方根呈線性關系，釋放速度為(461.9±41.9) μg·cm-2·h-1/2(n=4)。

　　2.3 經皮滲入機能

　　體外經皮滲入特征是評價經皮給藥系統的主要指標之一。本文采用擴散池法對氫溴酸加蘭他敏透皮貼劑經離體豬皮的滲入機能進行考績，結不美觀剖明該貼劑(藥物含量為1.7 mg·cm-2)24 h累積滲入量為(20.904±3.050) μg·cm-2(圖3)，擬合結不美觀(表2)剖明滲入曲線合適零級動力學方程，其透皮速度為(1.270±0.229) μg·cm-2·h-1，透皮時滯為(6.4±0.7) h(n=6)。

　　2.4 分歧透皮貼劑經皮滲入機能斗勁

　　本研究制備的氫溴酸加蘭他敏貼劑具有精采的藥物釋放機能和必然水平的經皮滲入機能，但經皮(豬皮)滲入機能欠佳，24 h累積滲入量僅為21 μg·cm-2，透皮速度僅為1.3 μg·cm-2·h-1，且透皮時滯較長為6 h。為斗勁分歧透皮貼劑經皮滲入機能，筆者曾以加蘭他敏游離堿和煙堿為藥物以不異配方分袂制得透皮貼劑并進行經離體豬皮滲入嘗試，結不美觀剖明(表3)加蘭他敏游離堿的滲入速度和24 h累積滲入量約為其鹽的1.7倍;加蘭他敏游離堿比其鹽有更好的滲入特征但滲入機能仍然欠安，其滲入速度和24 h累積滲入量僅為煙堿的6%，透皮時滯延遲3.5 h。表2 氫溴酸加蘭他敏貼劑的滲入速度和透皮時滯表3 分歧透皮貼劑藥物經由過程豬皮的滲入機能

　　2.5 經皮滲入試驗中皮膚的選擇

　　在經皮滲入試驗中，一捌揭捉�∮们‘數膭游锲つw模子進行透皮研究，如大鼠、小鼠、家兔、蛇、豬、裸鼠等。裸鼠其皮膚無毛，能避免脫毛時對角質層的損傷，其皮膚結構也與人相似，為較理想的選擇，但其價錢昂貴。大鼠、小鼠和家兔皮膚常用作嘗試材料，但制備離體皮膚時需脫毛，化學脫毛與電動剃刀脫毛效不美觀均不理想。豬皮的滲入性和人皮的滲入性接近，脫毛較輕易，且后續該貼劑藥效學研究(另軍備道)采用豬為試驗動物，故本嘗試采用豬皮作為皮膚模子。值得注重的是，皮膚的選擇和措制揭捉�现赜绊懲钙�嘗試的一再性，因為統一動物，背部和腹部皮膚的滲入性分歧;統一部位，措置體例或措置水平紛歧其滲入性也分歧。本試驗采用豬背部皮膚，但措置時發現除去其皮下脂肪后其表皮厚度紛歧。經皮滲入試驗結不美觀剖明一再性較差，故豬皮作為嘗試模子還需穩重考慮。

　　2.6 Franz擴散池法的切確度和慎密度

　　本文進行體外藥物釋放和經皮滲入機能研究時均采用Franz擴散池裝配。筆者曾以氫溴酸加蘭他敏溶液為研究對象，不使用嘗試皮膚，對普遍使用的Franz擴散池法進行切確度和慎密度考績。結不美觀剖明跟著抽樣次數增多，體例的切確度和慎密度下降。為提高該體例的切確度和慎密度，可削減抽樣次數，削減抽樣溶液體積和增添擴散池容積。

　　 3 結 論

　　本研究采用Franz擴散池裝配和一階導數光譜法考績氫溴酸加蘭他敏透皮貼劑的藥物釋放機能以及采用Franz擴散池裝配和高效液相色譜測定體例考績氫溴酸加蘭他敏貼劑經離體豬皮的滲入機能，結不美觀剖明該貼劑(1.7 mg·cm-2)24 h累積釋放量跨越95%，貼劑24 h累積滲入量為21 μg·cm-2，透皮速度為1.3 μg·cm-2·h-1，透皮時滯為6 h。是以，本研究制備的氫溴酸加蘭他敏貼劑具有精采的藥物釋放機能和必然水平的體外經皮滲入機能。

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