靈芝孢子粉對肝癌細胞的抑制作用

    方法: 運用MTT法研究靈芝孢子粉水溶性成份在體外對HepG2細胞的抑制作用, 并利用裸小鼠的移植瘤模型研究靈芝孢子粉在體內對HepG2細胞的生長抑制作用. HE染色觀察肝癌組織結構和細胞形態改變。 

    結果: TMTT實驗結果表明靈芝孢子粉對HepG2細胞的IC50值隨作用時間增加而減小,72 h達到最低, 為2.14 g/L. 體內抑瘤實驗結果顯示靈芝孢子粉為2000mg/kg時, 對裸小鼠移植瘤的抑制率為57.0%. 鏡下觀察靈芝孢子粉治療組腫瘤壞死組織較多, 細胞異型性較小。 

    結論: 高濃度及高劑量的靈芝孢子粉具有抑制腫瘤細胞生長的作用。 

    背景資料：靈芝是擔子菌綱多孔科靈芝屬真菌, 公認為扶正固本, 滋補強壯的傳統中藥. 臨床報道孢子粉可改善機體的免疫功能, 防治癌癥, 減輕患者對放、化療的不良反應。 

    靈芝是擔子菌綱多孔科靈芝屬真菌, 其生長成熟后所散發出來的孢子體即靈芝孢子粉。 靈芝孢子粉富含多糖肽, 有機鍺, 多種氨基酸, 脂肪酸及微量元素等成份. 臨床報道孢子粉可改善機體的免疫功能, 防治癌癥, 減輕患者對放、化
療的不良反應。 以往藥理研究表明, 靈芝孢子粉可增強免疫功能, 并對多種移植性動物腫瘤有明顯的抑制作用[1-3]. 但靈芝孢子粉對體外培養人癌細胞的直接作用及人癌裸鼠移植瘤治療作用的研究則較少. 本文報道靈芝孢子粉體外對
人肝癌細胞株HepG2生長的抑制作用及對裸小鼠人HepG2移植瘤的抗腫瘤作用的研究。 

    1 材料和方法 

    1.1 材料 HepG2為人肝癌細胞株 

    1.2 方法 

    1.2.1 體外細胞毒實驗(MTT法) 

    1.2.2 體內抑瘤實驗(人肝癌細胞HepG2裸鼠移植瘤的生長抑制實驗): 取對數生長期的人肝癌HepG2細胞, 2.5 g/L胰酶消化后, 用無血清DMEM配成1×1010 cell/L的單細胞懸液. 在無菌條件下接種于裸鼠腋窩皮下, 0.2 mL/只(相當于每只裸鼠接種2×106個腫瘤細胞)[5]. 接種1 wk后可見腫瘤生長, 當腫瘤大小到直徑約為3-4 mm時(接種10 d以后), 將荷瘤裸鼠按腫瘤大小隨機分為3組, 每組7-8只裸鼠, 雌雄兼有, (1)空白組:生理鹽水100 mL/kg, ig, 每日給藥; (2)陽性對照組: 5-FU, 用生理鹽水稀釋, 無菌分裝, 20 mg/kg,i p, 隔日給藥; (3)給藥組: 靈芝孢子粉B, 5 g/LCMC-Na配制, 高壓滅菌, 2000 mg/kg, ig, 每日給藥。 共給藥21 d. 自接種后每日測量裸鼠體質量,每周用游標卡尺測量裸鼠腫瘤的長(a)短(b)徑,并按以下公式計算相對體積. V = 0.5ab2, 各組按時間點的平均瘤體積作生長曲線圖. 末次給藥后24 h時處死動物, 剝離腫瘤稱質量. 做大體和病理觀察, 部分腫瘤組織用40 g/L多聚甲醛固定,石蠟包埋, 連續4 μm切片, HE染色, 光鏡下觀察肝癌細胞壞死, 形態改變情況。計算各組抑瘤率,抑瘤率 = (1-用藥組平均瘤質量/空白組平均瘤質量)×100%, 實驗重復兩次。統計學處理 用SPSS10.0統計軟件進行分析, 結果以mean±SD表示, 用One-Way ANOVA和t -test進行分析. 給藥組組間比較用LSD法。 

    2 結果 

    靈芝孢子粉水溶性成份對HepG2細胞的作用 靈芝孢子粉水溶性成份對HepG2細胞具有明顯的抑制作用, 隨著時間延長和劑量的增加, 對研發前沿藥理研究表明, 靈芝孢子粉可增強免疫功能, 并對多種移植性動物腫瘤有明顯的抑制
作用。

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