安閑拉莫三嗪對腦出血大鼠腦組織含水量的影響

    拉莫三嗪(LTG)主要用于難治性癲的治療。其作用環(huán)節(jié)是抑制突觸前膜興奮性氨基酸谷氨酸的釋放，抑制鈉通道開放，穩(wěn)定過度興奮的神經(jīng)元膜，減少Cl�埠虷2O被動進人細胞，達到減輕腦水腫的作用。國內有報道LTG可通過降低神經(jīng)細胞外液谷氨酸的濃度，減輕腦外傷后急性腦水腫，但對腦出血后腦水腫的治療作用未見報道。本研究將觀察拉莫三嗪(LTG)能否通過減輕腦水腫發(fā)揮神經(jīng)保護作用。

　　1 資料與方法

　　1.1 實驗動物和分組 健康成年雄性Wistar大鼠72只，體質量220～250 g，由鄭州大學實驗動物中心提供，合格證號：SYK2006��11。隨機分為對照組8只，手術組32只，治療組32只。后2組又分為12 h、1 d、3 d、7 d四個時間點進行腦組織含水量檢測，每組每個時間點為8只大鼠。

　　1.2 腦出血模型的制作和成功的標志 大鼠經(jīng)10%水合氯醛(400mg/kg)腹腔注射麻醉后，俯臥位固定于立體定位儀上，用微量進樣器由股動脈抽取血液50 μl緩慢注入尾狀核位置，留針15 min。 對照組注入等量生理鹽水。動物麻醉清醒后，參照Zea Longa 等評分標準，累積1分以上為成功模型。

　　1.3 腦組織含水量的測定 實驗大鼠斷頭取腦后，取進針道前約3 mm厚的腦組織。用電子天平先稱取濕重，電熱恒溫培養(yǎng)干燥兩用箱100℃烘烤48 h，再稱取干重。利用腦組織含水量=(鮮質量-干質量)/鮮質量×100%進行計算。

　　1.4 統(tǒng)計學方法 所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示組間比較用方差分析, 數(shù)據(jù)處理采用SPSS 12.0軟件進行分析。α=0.05為檢驗水準。

　　2 結果

　　2.1 實驗動物的一般情況 在腦出血模型中，有3只大鼠死亡，其中4只死于麻醉意外，2只死于出血波及顱底，由備用動物補充。腦出血組動物麻醉清醒后均出現(xiàn)不同程度的精神萎靡，反應遲鈍，自潔能力下降，進食減少。對照組大鼠精神恢復，反應及進食正常。腦出血大鼠于術后6 h即可觀察到其行為學改變，均出現(xiàn)較明顯左側肢體偏癱、旋轉爬行或拖步行走，神經(jīng)缺損體征以造模后12～24 h最為明顯，72 h后分別出現(xiàn)不同程度的改善。對照組未出現(xiàn)上述神經(jīng)缺損癥狀。

　　2.2 腦組織含水量變化 手術組腦組織含水量在出血后12 h開始增加，3 d時水腫達到峰值，7 d有所減輕，治療組與手術組比較各時間點的腦組織含水量均相應降低，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。對照組在12 h～7 d變化不明顯。詳見表1。表1 各時間點大鼠腦組織含水量的變化　與對照組比較，*P<0.05;與手術組比較，#P<0.05

　　3 討論

　　拉莫三嗪的化學結構為3，5�捕�氨基��6��(2，3�捕�氯苯基)��1，2，4�踩�丫嗪，目前主要用于難治性癲的治療。其作用環(huán)節(jié)是抑制突觸前膜興奮性氨基酸谷氨酸的釋放，抑制鈉通道開放，穩(wěn)定過度興奮的神經(jīng)元膜，減少Cl�埠虷2O被動進人細胞內達到減輕腦水腫的作用。

    國內有報道LTG可通過降低神經(jīng)細胞外液谷氨酸的濃度，減輕腦外傷后急性腦水腫[2]，但對腦出血后腦水腫的治療作用未見報道。本研究發(fā)現(xiàn)腦出血后手術組腦組織含水量在出血后12 h開始增加，3 d時水腫達到峰值，7 d有所減輕，治療組與手術組比較各時間點的腦組織含水量均相應降低，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。對照組在12 h～7 d變化不明顯。認為其可能機制是：(1)作用于電壓依賴鈉通道，抑制突觸前膜谷氨酸的釋放，從而使NR1激活減少，細胞損害減輕。本實驗中可見NR1在治療組的陽性表達明顯減少，細胞損害減輕，與Bather[3]， Pisani[4]的研究一致。(2)作用于電壓門控性鈣通道(VGCCs)參與神經(jīng)元興奮性和傳導性的調節(jié)，并通過鈣離子濃度的變化影響第二信使系統(tǒng)。VGCCs還參與細胞毒性作用，通過激活一系列酶活動，產(chǎn)生細胞損害。LTG可作用于VGCCs調節(jié)神經(jīng)遞質釋放，降低鈣調性細胞毒性而發(fā)揮神經(jīng)保護作用。此外對離體腦皮層突觸小體的研究中，發(fā)現(xiàn)LTG通過減少突觸前膜鈣離子內流，以濃度依賴的方式，抑制由4�睞P誘導的皮質，紋狀體谷氨酸鹽的釋放。還能減少因膜去極化產(chǎn)生的細胞內游離鈣離子濃度升高[5]。

　　該研究提示拉莫三嗪可以減輕實驗腦出血大鼠腦組織含水量，早期應用拉莫三嗪進行治療可能作為預防和減輕腦損傷的有效途徑。

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