康瑞花,高順強
[摘 要]
目的 研究神經生長因子在斑禿皮損中的表達,探討其與斑禿發病的關系。
方法 應用免疫組化的方法檢測了NGF 在30 例斑禿皮損中的表達和分布,以16 例正常人頭皮為對照。
結果 斑禿皮損中NGF 的表達明顯低于正常對照組。
結論 NGF 的表達減弱可能與斑禿的發病有關。
Expression of Nerve Growth Factor( NGF) in Lesion of Alopecia Areata
KANG Rui2hua ,GAO Sun qiang( Department of Dermatology , The Fourth Hospital Medical University , S hijiaz huang 050011 , China)
Abstract :
Objective To investigate the expression of nerve growth factor (NGF) and the relationship between the NGFand alopecia areata (AA) .
Methods The skin lesions of 30 case with AA were observed with immunohistochemistry and 16 normal scalp specimens were taken as controls.
Results The expressive intensity in the AA groups were significantly lower thanthose in controls.
Conclusion It suggested that decreaed NGF expression may be concerned in pathogenesis of AA.
神經生長因子(nerve growth factor ,N GF) 是典型的神經營養因子,是維持外周神經系統的交感神經元和感覺神經元存活和分化的必要因子。有人通過鼠皮片器官培養發現N GF 對毛囊角質形成細胞的周期性生長具有調節作用,說明該因子在正常毛發的周期性生長中起一定作用[1 ] 。但N GF 與斑禿發病的關系未見報道。為了探討N GF 與斑禿的發病關系,我們采用免疫組化的方法對斑禿皮損和正常人頭皮中N GF 的表達進行檢測,結果報告如下。
1 資料和方法
1. 1 病例選擇與分組 斑禿患者30 例,均為1999 年9 月~2001 年5 月經我院皮膚科臨床及病理診斷確診的門診病人,其中男16 例,女14 例;年齡11~67 歲;病程2 天~14 年,平均3 年。在斑禿患者脫發區與正常頭皮交界處用環鉆取材。對照組16 例標本取自腦外科手術切口處。所有標本取后立即放入10 %福爾馬林溶液內,石蠟包埋后備用。
1. 2 主要試劑 N GF 抗體(工作液濃度為1∶100) 和復合消化液。
1. 3 實驗方法 采用免疫組化SP 法,抗原修復應用胰酶消化的方法。實驗以PBS替代一抗作為空白對照,并設陰性對照。
1. 4 統計學處理方法 采用秩和檢驗。
2 結果
2. 1 結果判定標準 以胞質染有棕黃色顆粒為陽性。判定標準根據Shimizu 法[2 ]改良而成,著色范圍以陽性細胞數占總細胞數的百分率記分: < 2 %為0 ,2 %~20 %為1 ,21 %~50 %為2 , > 50 %為3 ;著色強度依據深淺記分:無著色為0 ,淺著色為1 ,深著色為2 。上述兩項相加為著色程度積分: < 2 為陰性,2~2. 9 為弱陽性( + ) ,3~3. 9 為陽性(2 + ) , ≥4 為強陽性(3 + ) 。在表皮層,每標本數3 個視野,對基底層、棘層和顆粒層分別進行統計,求其均數。在毛囊,每標本數1~3 個毛囊(因有的斑禿皮損標本中只有一個或兩個毛囊) ,記分方法同前。
2. 2 結果發現 N GF 在正常頭皮表皮的基底層細胞、靠近基底層的部分棘層細胞、毛囊、皮脂腺、汗腺表達明顯(見圖1 ,3) 。與正常對照相比,斑禿皮損區表達較弱(見圖2 ,4) 。斑禿組患者皮損(表皮與毛囊) 中N GF 表達與正常對照組比較差異有顯著性( UC 分別為2. 517 和1. 138 , P < 均0. 05) 。詳見表1 。
圖1 NGF 在正常頭皮表皮層 圖2 NGF 在斑禿皮損表皮基 圖3 NGF 在正常頭皮毛囊外 圖4 NGF 在斑禿皮損毛囊無
呈強陽性表達 DAB 染 底層表達呈弱陽性 毛根鞘表達呈強陽性 表達DAB 染色
×200色 DAB 染色×200 DAB 染色×200
表1 兩組表皮和毛囊中的NGF 表達程度比較
組別例數
陰性
( - )
弱陽性
( + )
陽性
(2 + )
強陽性
(3 + )
Uc P
斑禿組
表皮30 6 15 7 2 2. 517 < 0. 05
毛囊30 18 7 4 1 2. 138 < 0. 05 3 討論
斑禿的發病機制目前仍不完全清楚,可能與毛發生長周期的紊亂有關。正常毛發生長周期分為三期:生長期、退化期和靜止期,毛囊峽部神經網的密度隨這種周期性變化而改變,在毛囊生長早期神經網密度最高,而生長晚期開始降低,到靜止期降到最低[3 ] 。而N GF 對這些外周神經元的存活和分化具有重要作用[4 ] 。同時有研究發現,N GF 是角質形成細胞的有效絲裂原,可阻斷內源性N GF 的分泌,誘導角質形成細胞凋亡[5 ] 。在胚胎發育期,表皮內陷形成毛囊,毛囊外根鞘相當于表皮基底層及棘層[6 ] ,因此我們重點對N GF 在表皮及毛囊中的表達進行研究。結果發現N GF 在斑禿皮損中的表達明顯低于正常對照,我們推測N GF 的表達降低可能參與了斑禿的發病,其確切機制尚有待于進一步研究。
[ 參 考 文 獻]
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[ 4 ] 孫衛民王惠琴主編. 細胞因子研究方法學[M] . 北京:人民衛生出版社. 1999 ,694 - 704.
[ 5 ] Carlo P ,Anne RH ,Luisa B , et al . Autocrie nerve growth factor protectshuman keratinocytes from apoptosis through its high affinity receptor( TRK) :A role for Bcl22[J ] . The journal of investigative dermatology.1997 ,109 (6) :757 - 763.
[ 6 ]趙辨主編. 臨床皮膚病學[M] . 第3 版. 南京:江蘇科學技術出版社,2001 :6 - 74.
對照組
表皮16 1 5 6 4
毛囊16 3 5 4 4
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