癲癇康膠囊是由黨參、白術(shù)、茯苓、陳皮、制半夏、炙甘草、膽南星、全蝎、僵蠶等藥經(jīng)提取制成的純中藥制劑;具有補(bǔ)脾益氣,祛痰化濕,開竅定癇之功效,用于治療脾虛痰濕之癲癇病。臨床研究證實(shí)該藥對癲癇病具有較好的治療效果。我們應(yīng)用硫酸鋅所致家兔癲癇模型對癲癇康膠囊進(jìn)行了藥理研究。
1 試驗(yàn)材料
1.1 試驗(yàn)樣品 癲癇康膠囊,批號(hào):20010312;給藥前,將癲癇康膠囊用蒸餾水配置成23.1%、11.5%和5.75%(V/V)的液體。
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物 健康成年雄性家兔49只,體重2.0~2.5kg。
1.3 飼養(yǎng)條件 溫度(22±2)℃,濕度(50±10)%,光照12h•日-1,排氣通風(fēng)2次/日,單性分籠飼養(yǎng),飼料為家兔全價(jià)營養(yǎng)飼料和青飼料。
1.4 試驗(yàn)儀器 多導(dǎo)生理記錄儀(日本光電公司);721分光光度計(jì)(上海)。
1.5 對照藥物:苯妥英鈉片(江蘇鹽城制藥有限公司,批號(hào)20020105),給藥前,用蒸餾水將3片配置成100mL。
1.6 其它材料 硫酸鋅(廣州化學(xué)試劑廠,批號(hào)20011102-1),使用前用蒸餾水配置成2.0% 的溶液。
2 試驗(yàn)方法
2.1 動(dòng)物分組和給藥 動(dòng)物依體重隨機(jī)分層均分為5組:
(1)癲癇康膠囊3.00g•kg-1;(2)癲癇康膠囊1.50g•kg-1;(3)癲癇康膠囊0.75g•kg-1;(4)苯妥英鈉30mg•kg-1;(5)蒸餾水10.0g•kg-1。
每日插胃管ig給藥1次,給藥容量為10.0mL•kg ;
2.2 動(dòng)物手術(shù) 動(dòng)物給藥14d后在戊巴比妥鈉25mg•kg ip麻醉下實(shí)施手術(shù),并輔以2%普魯卡因局部麻醉。將家兔頭部固定在立體定位儀上,無菌條件下暴露顱骨,依照Sawyer圖譜在P4,LL4.5,LR4.5,H6處置入外徑為1.0mm 的聚乙烯塑料管(內(nèi)經(jīng)不銹鋼針導(dǎo)引),用以置入記錄海馬放電的電極和注射藥物。注射藥物內(nèi)管直徑為0.6ram,長7.5mm,記錄海馬放電的電極為外周絕緣的銀絲(直徑0.5mm,長7.5mm),僅在實(shí)驗(yàn)時(shí)置入。此外,在A10,P10,LL3,RL3處分別用骨鉆開4個(gè)直徑為lmm的小孔,保護(hù)硬腦膜的完整性,同時(shí)置入4個(gè)記錄ECoG的不銹鋼電極,以牙托粉固定。術(shù)后肌肉注射青霉素10萬單位/只。
2.3 試驗(yàn)觀察和EHG記錄 術(shù)后24h再次給藥,給藥后20min進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察。首先引導(dǎo)正常的EHG,掃描速度200msec/格,放大倍數(shù)100 uv/格,高頻濾波30Hz。記錄時(shí)間1.5min。結(jié)果描記在日本光電公司生產(chǎn)的多導(dǎo)電生理記錄儀上。而后將注射藥物內(nèi)管經(jīng)塑料管插入到海馬區(qū)域,由內(nèi)管直接緩注射時(shí)間為5min,注射結(jié)束后針管保留5min后取出,分別在注射ZnSO 前(正常)、注射ZnSO 結(jié)束后30min、1h、2h、4h、8h和24h(24h記錄前30min再次給藥),記錄雙側(cè)EHG。同時(shí)按照癲癇發(fā)作的行為表現(xiàn)觀察及記錄動(dòng)物行為(將動(dòng)物行為由輕至重分為6級。0級:安靜;1級:口或面部抽動(dòng);2級:點(diǎn)頭,轉(zhuǎn)圈,濕狗反應(yīng);3級:前肢陣攣,咀嚼流涎;4級:直立陣攣;5級:立起和跌倒交替出現(xiàn);6級:發(fā)作過度導(dǎo)致死亡)。試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,組間進(jìn)行t檢驗(yàn)。