癲癇康膠囊是由黨參、白術、茯苓、陳皮、制半夏、炙甘草、膽南星、全蝎、僵蠶等藥經提取制成的純中藥制劑;具有補脾益氣,祛痰化濕,開竅定癇之功效,用于治療脾虛痰濕之癲癇病。臨床研究證實該藥對癲癇病具有較好的治療效果。我們應用硫酸鋅所致家兔癲癇模型對癲癇康膠囊進行了藥理研究。
1 試驗材料
1.1 試驗樣品 癲癇康膠囊,批號:20010312;給藥前,將癲癇康膠囊用蒸餾水配置成23.1%、11.5%和5.75%(V/V)的液體。
1.2 試驗動物 健康成年雄性家兔49只,體重2.0~2.5kg。
1.3 飼養條件 溫度(22±2)℃,濕度(50±10)%,光照12h•日-1,排氣通風2次/日,單性分籠飼養,飼料為家兔全價營養飼料和青飼料。
1.4 試驗儀器 多導生理記錄儀(日本光電公司);721分光光度計(上海)。
1.5 對照藥物:苯妥英鈉片(江蘇鹽城制藥有限公司,批號20020105),給藥前,用蒸餾水將3片配置成100mL。
1.6 其它材料 硫酸鋅(廣州化學試劑廠,批號20011102-1),使用前用蒸餾水配置成2.0% 的溶液。
2 試驗方法
2.1 動物分組和給藥 動物依體重隨機分層均分為5組:
(1)癲癇康膠囊3.00g•kg-1;(2)癲癇康膠囊1.50g•kg-1;(3)癲癇康膠囊0.75g•kg-1;(4)苯妥英鈉30mg•kg-1;(5)蒸餾水10.0g•kg-1。
每日插胃管ig給藥1次,給藥容量為10.0mL•kg ;
2.2 動物手術 動物給藥14d后在戊巴比妥鈉25mg•kg ip麻醉下實施手術,并輔以2%普魯卡因局部麻醉。將家兔頭部固定在立體定位儀上,無菌條件下暴露顱骨,依照Sawyer圖譜在P4,LL4.5,LR4.5,H6處置入外徑為1.0mm 的聚乙烯塑料管(內經不銹鋼針導引),用以置入記錄海馬放電的電極和注射藥物。注射藥物內管直徑為0.6ram,長7.5mm,記錄海馬放電的電極為外周絕緣的銀絲(直徑0.5mm,長7.5mm),僅在實驗時置入。此外,在A10,P10,LL3,RL3處分別用骨鉆開4個直徑為lmm的小孔,保護硬腦膜的完整性,同時置入4個記錄ECoG的不銹鋼電極,以牙托粉固定。術后肌肉注射青霉素10萬單位/只。
2.3 試驗觀察和EHG記錄 術后24h再次給藥,給藥后20min進行實驗觀察。首先引導正常的EHG,掃描速度200msec/格,放大倍數100 uv/格,高頻濾波30Hz。記錄時間1.5min。結果描記在日本光電公司生產的多導電生理記錄儀上。而后將注射藥物內管經塑料管插入到海馬區域,由內管直接緩注射時間為5min,注射結束后針管保留5min后取出,分別在注射ZnSO 前(正常)、注射ZnSO 結束后30min、1h、2h、4h、8h和24h(24h記錄前30min再次給藥),記錄雙側EHG。同時按照癲癇發作的行為表現觀察及記錄動物行為(將動物行為由輕至重分為6級。0級:安靜;1級:口或面部抽動;2級:點頭,轉圈,濕狗反應;3級:前肢陣攣,咀嚼流涎;4級:直立陣攣;5級:立起和跌倒交替出現;6級:發作過度導致死亡)。試驗數據進行統計學分析,組間進行t檢驗。