蒙藥肉蔻五味丸是蒙醫(yī)臨床上常用的蒙成藥中蘆丁含量測量

     蒙藥肉蔻五味丸是蒙醫(yī)臨床上常用的蒙成藥，收載于《內(nèi)蒙古蒙成藥標(biāo)準(zhǔn)》，由肉豆蔻、土木香、木香、廣棗、篳撥五味藥組成。肉蔻五味丸為黃褐色水丸，氣香，味辛。主治心煩失眠，神氣不寧。其中蘆丁是廣棗的主要成分。

1實(shí)驗(yàn)方法 
     1.1儀器與試藥：LC-10ATVP高效液相色譜儀（日本島津公司），SPD-10ATVP紫外可見分光光度檢測器（日本島津公司），N-2000雙通道色譜工作站（浙江大學(xué)智能信息工程研究所），751G型紫外一可見分光光度計(jì)，SK-2000LH（上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司），Satodus電子分析天平（德國Satorius公司），80-2型離心沉淀器（上海手術(shù)器械廠）。肉蔻五味丸由內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院蒙藥制劑室提供，水為超純水，甲醇，磷酸為色譜純。 
     
     l.2色譜條件：色譜柱為VP-ODS（150 mmx4.6 mm），流動(dòng)相為甲醇一水一磷酸（60：40：0.02，V/V），流速為0.6 ml/min，檢測波長為370 nm，標(biāo)樣進(jìn)樣量為5ul，試樣進(jìn)樣量為10ul，室溫下操作。 
     
     1.3溶液的制備：①對(duì)照品溶液的制備：精密稱取蘆丁對(duì)照品0.004 30g，加甲醇適量溶解，定容制成每1 ml中含0.43mg的溶液，即得0.43 mg/ml的蘆丁對(duì)照品儲(chǔ)備液。②供試品溶液的制備：精密稱取肉蔻五味丸0.2 g，置lO ml容錘瓶中．加甲醇適量，超聲處理35 min，放置室溫，離心沉降，取上清液。搖勻，用微孔濾膜（O.45um）濾過，即得。

2實(shí)驗(yàn)結(jié)果 
     2.1線性關(guān)系考察：取上述蘆丁儲(chǔ)備液用甲醇稀釋制成8.6，17.2，25.8，34.4，43ug/ml的蘆丁系列對(duì)照品溶液，備用。精密量取蘆丁對(duì)照品的以上5種系列溶液各5ul，注入高效液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，蘆丁濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程：C（濃度）=-0.1064+5.362x10-7A（峰面積），相關(guān)系數(shù)r=0.9991。蘆丁在8.6~43ug/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。 
     
     2.2精密度試驗(yàn)：取對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，按含量測定方法測定峰面積，測得峰面積的RSD=1.9％。 
     
     2.3 重現(xiàn)性試驗(yàn)：取同一批號(hào)的樣品5份，接樣品處理方法處理。在上述色譜條件下，測定。5個(gè)樣品峰面積的RSD=2.1％。 
     
     2.4回收率試驗(yàn)：取5份已知含量（蘆丁含量為0.2050 mg/g）的樣品0.2g，研碎．置具塞50 ml三角燒瓶中，加甲醇10ml超聲提取40min，轉(zhuǎn)置25ml容量瓶中，加入蘆丁的對(duì)照品溶液（高、中、低濃度）1ml，加甲醇至刻度，搖勻，按含量測定方法測定總含量，計(jì)算回收率，蘆丁的平均回收率為98.4％，RSD=2.2％。 
     
     2.5樣品測定：在上述色譜條件下，注入供試品溶液10ul，測定峰面積，用回歸方程計(jì)算濃度，計(jì)算含量。 
    
3討論 
     3.1檢測波長的選擇：蘆丁的最大吸收波長在240 nm和370 nm處。但在選定的色譜條件下，240 nm處被測樣品的干擾峰較多，因此本文選擇370 nm為蘆丁的檢測波長。 
     
     3.2流動(dòng)相比例的選擇：在本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)甲醇量比例增大時(shí)蘆丁的保留時(shí)間縮短。如流動(dòng)相比例為：甲醇-水-磷酸（45：55：0.02）時(shí)蘆丁的保留時(shí)間為14 rain左右。最終所選比例為：甲醇-水-磷酸（60：40：0.02），此時(shí)蘆丁的保留時(shí)間為4.6min，達(dá)到分離度要求。

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