血栓心脈寧膠囊對急性血瘀模型大鼠血小板功能及血液流變學的影響

    血栓心脈寧膠囊是純中藥制劑，主要由川芎、丹參、水蛭、麝香、牛黃、毛冬青、槐花、人參莖葉皂苷、冰片、蟾蜍等10種中藥材組成。具有芳香開竅、活血散瘀功能，主治腦血栓、冠心病心絞痛屬于血瘀證者。為證實其化瘀通脈作用，本文通過觀察急性血瘀模型大鼠血小板聚集及血液流變學的變化，評價血栓心脈寧膠囊的活血化瘀作用，為其臨床治療缺血性心、腦血管疾病提供科學依據。

    1材料與方法

    1.1動物清潔級Wistar大鼠，雌雄各半，200~220 g，合格證號SCXK-(吉) 2007-0003，由吉林大學實驗動物中心提供。

    1.2實驗藥品及儀器血栓心脈寧膠囊，實驗時以0.5%羧甲基纖維素鈉配制成所需濃度;血栓素B2(TXB2)及6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)試劑盒，北京美迪科生物技術有限公司提供，批號：20090825;0.1%鹽酸腎上腺素注射液(1 mg/ml)，北京永康制藥廠出品，批號：2009103029。LBY-N6A旋轉式血液黏度計及LBY-NJ2型血小板聚集儀：北京普利生集團產品;XN3型紅細胞電泳計時器：上海第一醫學院產品。

    1.3實驗方法50只大鼠隨機分為正常對照組、血瘀模型組及血栓心脈寧膠囊200、400、800 mg/kg 5組，每組10只。藥物組每日灌胃給藥1次，連續 6 d，正常對照組及血瘀模型組給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉2 ml/kg。除正常對照組大鼠外，其他各組大鼠均皮下注射0.1%腎上腺素0.8ml/kg，2 h后將大鼠浸入冰水中5 min，2 h后再按0.1%腎上腺素0.6 ml/kg注射一次以復制急性血瘀模型〔2〕。大鼠復制急性血瘀模型后禁食不禁水12 h，第7天給藥后1 h，每組動物以戊巴比妥鈉30 mg/kg腹腔注射麻醉，腹主動脈取血，肝素抗凝。從加有抗凝劑的 4ml全血中取出 1 ml加入LBY-N6A旋轉式血液黏度計，分別測定全血低切(10/s)、中切(40/s)及高切(160/s)黏度，余下3 ml全血以3 000 r/min離心10 min，取上層血漿 1ml加入黏度計測定血漿黏度(160/s);剩余血漿用放免法〔3〕測定血漿6-Keto-PGF1α(代表PGI2)及TXB2(代表TXA2)，以微量熱沉淀法〔4〕測定血漿纖維蛋白原濃度(Fib);腹主動脈取血1.5 ml，109 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝。1 500 r/min離心5min，取上層富血小板血漿(PRP)，余血3 000 r/min離心10 min，取貧血小板血漿(PPP)，用PPP調PRP至血小板數6×1011/L～7×1011/L。以LBY-NJ2型　　血小板聚集儀按比濁法〔5〕測定血小板聚集活性 ，求出1、3、5 min的血小板聚集率(PAG)及最大血小板聚集率(MPAG);以微量毛細管法〔6〕測定紅細胞壓積(Hct);通過XN3型紅細胞電泳計時器測定紅細胞電泳時間(RCET);測血沉(ESR);進一步推算出紅細胞聚集指數(EAI)及紅細胞剛性指數(ERI)。

    1.4統計學方法應用SPSS13.0統計軟件進行處理，實驗數據以x±s表示，多組間對比采用方差分析，兩組間比較采用t檢驗進行統計分析。

    2結果

    2.1對急性血瘀模型大鼠全血黏度及血漿黏度的影響與正常對照組比較，血瘀模型組大鼠全血低、中、高切黏度及血漿黏度均明顯增加(P<0.05或P<0.01)。與血瘀模型組比較，血栓心脈寧膠囊400、800 mg/kg組均可使全血低、中、高切及血漿黏度明顯降低(P<0.05或P<0.01)，血栓心脈寧膠囊200 mg/kg組對全血低、中、高切黏度及血漿黏度均無明顯影響(P>0.05)。

    2.2對急性血瘀模型大鼠血小板聚集功能的影響與正常對照組比較，血瘀模型組大鼠1、3、5 min PAG及MPAG均明顯升高(P<0.05或P<0.01)。與血瘀模型組比較，血栓心脈寧膠囊 400、800 mg/kg組均可使1、3、5 min PAG及MPAG明顯降低(P<0.05或P<0.01)，血栓心脈寧膠囊 200 mg/kg組對1、3、5 min PAG及MPAG均無明顯影響(P>0.05)。

    2.3對急性血瘀模型大鼠血液流變學的影響與正常對照組比較，血瘀模型組大鼠血漿Fib、ESR、Hct、EAI及ERI均明顯增加，而RCET明顯延長(P<0.05或P<0.01)。與血瘀模型組比較，血栓心脈寧膠囊 200、400、800mg/kg對上述血液流變學的異常變化，除RCET外，均有明顯改善作用(P<0.05或P<0.01)。

    2.4對急性血瘀模型大鼠血漿PGI2及TXA2的影響與正常對照組比較，血瘀模型組大鼠血漿TXA2含量明顯增加，PGI2含量及PGI2/TXA2比值明顯降低(P<0.05或P<0.01)。與血瘀模型組比較，血栓心脈寧膠囊200、400、800 mg/kg均可使急性血瘀模型大鼠血漿TXA2含量明顯降低，PGI2含量及PGI2/TXA2比值明顯增高(P<0.05或P<0.01)。

    本實驗給大鼠皮下注射大量的腎上腺素模擬暴怒時機體狀態，以冰水浸泡模擬寒邪侵入，建立大鼠氣滯血瘀模型，觀察血栓心脈寧膠囊對氣滯血瘀模型大鼠血小板功能及血液流變學的影響，符合中醫活血化瘀藥物的治療原則。血液流變學是研究循環血液的流動性、變形性、凝固性、黏彈性以及心血管黏滯性的科學。血液流變學有很多的檢驗項目，最常見的為全血高、中、低切三種黏度、血漿黏度、Fib、ESR、Hct、ERI等。當人體患心腦血管系統疾病時，血液的流變性發生異常，引起全身或局部循環和微循環障礙。血液黏度是衡量血液流變性的指標，黏度越高，流動性越小，越易堵塞血管形成血栓。血液黏度主要由Hct，血漿黏度，紅細胞聚集性及紅細胞變形性等因素決定。本實驗結果顯示，血栓心脈寧膠囊可使急性血瘀模型大鼠全血黏度、血漿黏度、血漿Fib濃度、ESR、Hct、ERI及EAI均明顯降低，說明其不僅能抑制紅細胞聚集，而且能降低紅細胞的脆性，增強其變形性。

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