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              神經(jīng)生長(zhǎng)因子在斑禿皮損中的表達(dá)

                        康瑞花,高順強(qiáng)

 

[摘　要]

目的　研究神經(jīng)生長(zhǎng)因子在斑禿皮損中的表達(dá),探討其與斑禿發(fā)病的關(guān)系。

方法　應(yīng)用免疫組化的方法檢測(cè)了NGF 在30 例斑禿皮損中的表達(dá)和分布,以16 例正常人頭皮為對(duì)照。

結(jié)果　斑禿皮損中NGF 的表達(dá)明顯低于正常對(duì)照組。

結(jié)論　NGF 的表達(dá)減弱可能與斑禿的發(fā)病有關(guān)。

 

 

KANG Rui2hua ,GAO Sun qiang( Department of Dermatology , The Fourth Hospital Medical University , S hijiaz huang 050011 , China)

 

　Objective 　To investigate the expression of nerve growth factor (NGF) and the relationship between the NGFand alopecia areata (AA) .

 Methods 　The skin lesions of 30 case with AA were observed with immunohistochemistry and 16 normal scalp specimens were taken as controls.

 Results 　The expressive intensity in the AA groups were significantly lower thanthose in controls.

Conclusion 　It suggested that decreaed NGF expression may be concerned in pathogenesis of AA.

 

 

      神經(jīng)生長(zhǎng)因子(nerve growth factor ,N GF) 是典型的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子,是維持外周神經(jīng)系統(tǒng)的交感神經(jīng)元和感覺(jué)神經(jīng)元存活和分化的必要因子。有人通過(guò)鼠皮片器官培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)N GF 對(duì)毛囊角質(zhì)形成細(xì)胞的周期性生長(zhǎng)具有調(diào)節(jié)作用,說(shuō)明該因子在正常毛發(fā)的周期性生長(zhǎng)中起一定作用[1 ] 。但N GF 與斑禿發(fā)病的關(guān)系未見(jiàn)報(bào)道。為了探討N GF 與斑禿的發(fā)病關(guān)系,我們采用免疫組化的方法對(duì)斑禿皮損和正常人頭皮中N GF 的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果報(bào)告如下。

 

1 　資料和方法

1. 1 　病例選擇與分組　斑禿患者30 例,均為1999 年9 月～2001 年5 月經(jīng)我院皮膚科臨床及病理診斷確診的門(mén)診病人,其中男16 例,女14 例;年齡11～67 歲;病程2 天～14 年,平均3 年。在斑禿患者脫發(fā)區(qū)與正常頭皮交界處用環(huán)鉆取材。對(duì)照組16 例標(biāo)本取自腦外科手術(shù)切口處。所有標(biāo)本取后立即放入10 %福爾馬林溶液內(nèi),石蠟包埋后備用。

 

1. 2 　主要試劑　N GF 抗體(工作液濃度為1∶100) 和復(fù)合消化液。

 

1. 3 　實(shí)驗(yàn)方法　采用免疫組化SP 法,抗原修復(fù)應(yīng)用胰酶消化的方法。實(shí)驗(yàn)以PBS替代一抗作為空白對(duì)照,并設(shè)陰性對(duì)照。

 

1. 4 　統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法　采用秩和檢驗(yàn)。

 

2 　結(jié)果

2. 1 　結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)　以胞質(zhì)染有棕黃色顆粒為陽(yáng)性。判定標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)Shimizu 法[2 ]改良而成,著色范圍以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占總細(xì)胞數(shù)的百分率記分: < 2 %為0 ,2 %～20 %為1 ,21 %～50 %為2 , > 50 %為3 ;著色強(qiáng)度依據(jù)深淺記分:無(wú)著色為0 ,淺著色為1 ,深著色為2 。上述兩項(xiàng)相加為著色程度積分: < 2 為陰性,2～2. 9 為弱陽(yáng)性( + ) ,3～3. 9 為陽(yáng)性(2 + ) , ≥4 為強(qiáng)陽(yáng)性(3 + ) 。在表皮層,每標(biāo)本數(shù)3 個(gè)視野,對(duì)基底層、棘層和顆粒層分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì),求其均數(shù)。在毛囊,每標(biāo)本數(shù)1～3 個(gè)毛囊(因有的斑禿皮損標(biāo)本中只有一個(gè)或兩個(gè)毛囊) ,記分方法同前。

 

2. 2 　結(jié)果發(fā)現(xiàn)　N GF 在正常頭皮表皮的基底層細(xì)胞、靠近基底層的部分棘層細(xì)胞、毛囊、皮脂腺、汗腺表達(dá)明顯(見(jiàn)圖1 ,3) 。與正常對(duì)照相比,斑禿皮損區(qū)表達(dá)較弱(見(jiàn)圖2 ,4) 。斑禿組患者皮損(表皮與毛囊) 中N GF 表達(dá)與正常對(duì)照組比較差異有顯著性( UC 分別為2. 517 和1. 138 , P < 均0. 05) 。詳見(jiàn)表1 。

 

 

 

3 　討論

斑禿的發(fā)病機(jī)制目前仍不完全清楚,可能與毛發(fā)生長(zhǎng)周期的紊亂有關(guān)。正常毛發(fā)生長(zhǎng)周期分為三期:生長(zhǎng)期、退化期和靜止期,毛囊峽部神經(jīng)網(wǎng)的密度隨這種周期性變化而改變,在毛囊生長(zhǎng)早期神經(jīng)網(wǎng)密度最高,而生長(zhǎng)晚期開(kāi)始降低,到靜止期降到最低[3 ] 。而N GF 對(duì)這些外周神經(jīng)元的存活和分化具有重要作用[4 ] 。同時(shí)有研究發(fā)現(xiàn),N GF 是角質(zhì)形成細(xì)胞的有效絲裂原,可阻斷內(nèi)源性N GF 的分泌,誘導(dǎo)角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡[5 ] 。在胚胎發(fā)育期,表皮內(nèi)陷形成毛囊,毛囊外根鞘相當(dāng)于表皮基底層及棘層[6 ] ,因此我們重點(diǎn)對(duì)N GF 在表皮及毛囊中的表達(dá)進(jìn)行研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)N GF 在斑禿皮損中的表達(dá)明顯低于正常對(duì)照,我們推測(cè)N GF 的表達(dá)降低可能參與了斑禿的發(fā)病,其確切機(jī)制尚有待于進(jìn)一步研究。

 

[ 參　考　文　獻(xiàn)]

[1 ] 范衛(wèi)新,朱文元. 神經(jīng)及神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)毛囊生長(zhǎng)的調(diào)控作用[J ] .國(guó)外醫(yī)學(xué)皮膚性病學(xué)分冊(cè),1999 ,25 (6) :332 - 336.

[ 2 ] Shimzu M ,Saitoh Y, Itoh H. Immunohistochemical staining of Ha2rasoncogene product in normal ,benign ,and malignant human pancreatic2tissues[J ] . Hum Pathol ,1990 ,21 :607 - 612.

[ 3 ] Hordinsky MK. Relationship between follicular nerve supply and alope2cia[J ] . Dermatol Clin ,1996 ,14 (4) :651 - 660.

[ 4 ] 孫衛(wèi)民王惠琴主編. 細(xì)胞因子研究方法學(xué)[M] . 北京:人民衛(wèi)生出版社. 1999 ,694 - 704.

[ 5 ] Carlo P ,Anne RH ,Luisa B , et al . Autocrie nerve growth factor protectshuman keratinocytes from apoptosis through its high affinity receptor( TRK) :A role for Bcl22[J ] . The journal of investigative dermatology.1997 ,109 (6) :757 - 763.

[ 6 ]趙辨主編. 臨床皮膚病學(xué)[M] . 第3 版. 南京:江蘇科學(xué)技術(shù)出版社,2001 :6 - 74.

 

 

 

對(duì)照組

表皮16 1 5 6 4

毛囊16 3 5 4 4